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高速逆流色譜(high speed countercurrentchromatography，簡稱HSCCC)是一種液-液色譜分離技術(shù)，它的固定相和流動相都是液體，沒有不可逆吸附，具有樣品無損失、無污染、高效、快速和大制備量分離等優(yōu)點(diǎn)。由于HSCCC與傳統(tǒng)的分離純化方法相比具有明顯的優(yōu)點(diǎn)，因此此項(xiàng)技術(shù)己被廣泛應(yīng)用于中藥成分分離、保健食品、生物化學(xué)、生物工程、天然產(chǎn)物化學(xué)、有機(jī)合成、環(huán)境分析等領(lǐng)域。
儀器構(gòu)造
儀器的中心部分：(a) ITO多層線圈分離柱，它是由100-200毫米長、內(nèi)徑為1.6mm左右的聚四氟乙烯管沿具有適當(dāng)內(nèi)徑的內(nèi)軸共繞十多層而成，其管內(nèi)總體積可達(dá)300mL左右。(b)平衡器，它可以調(diào)節(jié)重量，它的作用是讓(a)， (b)相對于中心軸兩邊重量平衡。當(dāng)在旋轉(zhuǎn)控制器的控制下，在齒輪傳動裝置作用下，(a)，(b)同時繞中心軸作順時針或反時針的行星運(yùn)動，即(a)- (b)本身既在自轉(zhuǎn)，但同時又在繞中心軸公轉(zhuǎn)，公轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)速可從0-4000r/min。從線圈分離柱中通過中空的中心軸還同時牽引出了線圈的兩端，一端供泵入液用，一端輸出液體。儀器工作需要互不相溶的兩種液體，一相作固定相， 一相作移動相。儀器工作前，先將作為固定相一相的液體通過恒流泵壓入線圈分離柱，然后用進(jìn)樣器將待分離的樣品進(jìn)樣，*后用恒流泵壓入移動相，同時啟動中心部分運(yùn)轉(zhuǎn)直到轉(zhuǎn)速大于600r/min。此時，兩相在線圈分離柱中具有相對運(yùn)動之勢。由于移動相源源不斷的壓入，阻止了固定相的流出，同時，移動相帶著樣品在線圈分離柱中進(jìn)行無限次的分配而使復(fù)雜樣品得到分離。當(dāng)移動相經(jīng)過檢測器時，由于不同的樣品組分會產(chǎn)生不同大小的信號，用記錄儀就能得到逆流色譜圖譜，同時用餾分收集器分步收集移動相就會得到復(fù)雜樣品被分開的組分。較大的制備型HSCCC，柱容積可達(dá)530m1，一次*多進(jìn)樣可達(dá)20g粗品；較小的分析型的HSCCC柱容積為8m1，進(jìn)樣量為幾十微克，*大轉(zhuǎn)速可達(dá)4000r/min。
高速逆流色譜的原理
1.逆流色譜是20世紀(jì)50年代源于多極萃取技術(shù)（非連續(xù)性）但是多極萃取設(shè)備*大復(fù)雜、易碎、溶劑體系容易乳化，溶劑耗量大，分離時間長。
2. 通過公轉(zhuǎn)、自轉(zhuǎn)（同步行星式運(yùn)動）產(chǎn)生的二維力場，保留兩相中的其中一相作為固定相。
2.通過高速旋轉(zhuǎn)提高兩相溶劑的萃取頻率，1000rpm旋轉(zhuǎn)時可達(dá)到17次/s頻率的萃取過程。
相關(guān)產(chǎn)品
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