PBS是磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline)一般作為溶劑,起溶解保護試劑的作用。它是生物化學研究中使用最為廣泛的一種緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,由于Na2HPO4和KH2PO4它們有二級解離,緩沖的pH值范圍很廣;而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供雙價陽離子。
注:PBS不是磷酸緩沖液(phosphate buffer solution,PB)。
配置方法
含0.05%吐溫-20的pH7.4的磷酸鹽緩沖液(簡稱為PBS-T)配制方法為:
稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4),磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O),氯化鈉(NaCl),氯.化鉀(KCl),吐溫-20 ,加水。
PBS:Phosphate Buffered Saline
PBS 1L配方pH7.4:
磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.24g,
磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.44g,
氯化鈉(NaCl):8g,
氯化.鉀(KCl):0.2g,
加去離子水約800mL充分攪拌溶解,然后加入濃鹽酸調pH至7.4,最后定容到1L
保存方法
加去離子水約800mL充分攪拌溶解,然后加入濃鹽酸調pH至7.4,最后定容到1L。高溫高壓滅菌后置于4攝氏度冰箱保存待用。
PBS緩沖液(pH7.2~7.4):
KH2PO42mM
Na2HPO4 8mM
NaCl 136mM
KCL 2.6mM
PBS緩沖液一般作為溶劑,起溶解保護試劑的作用,具體試劑一般也有不同的比例配方,在針對性上就有了更好的效果。
1x PBS緩沖液就是0.01M的磷酸鹽緩沖液,可直接使用。2x PBS就是2倍濃度,使用時稀釋一倍使用。0.1M的PBS一般不用來配置緩沖液,用于其它用處。
作用
PBS是磷酸緩沖鹽溶液的簡稱,不僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。
原因就是它具有鹽平衡、可調整的適宜pH緩沖作用,蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結構及生物特性;生理鹽水不具有調整pH的作用,對完整的、具有活性的物質不能保證其在最適條件下參與生物反應,所以使用PBS是首.選。
PBS也不是萬能的,有的生物活性物質需要的條件比PBS還要高,就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分,維持*佳的條件保證生物活性物質保持其最完整的特性。
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