威尼德分子雜交儀VH-2000:核酸分子雜交中常用雜交管規(guī)格以及應(yīng)用
在雜交管中進(jìn)行探針標(biāo)記以及預(yù)雜交和雜交,被許多分子生物學(xué)家認(rèn)為是與Southern, Northern, Dot, Slot or Colony Blots等實(shí)驗(yàn)的*佳方法。雜交管瓶內(nèi)雜交意味著與傳統(tǒng)系統(tǒng)中進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)相比,使用探針體積會顯著減少,并且探針在膜表面的持續(xù)移動會導(dǎo)致非常有效的雜交反應(yīng)。在分子雜交儀中,溶液的溫度被精確控制和調(diào)節(jié)
一般雜交管都采用進(jìn)口低溶出硼硅酸鹽玻璃制作,堅(jiān)固耐用,熱穩(wěn)定性優(yōu)良,可用于大部分的標(biāo)準(zhǔn)分子雜交儀,比如威尼德生物科技(北京)有限公司,分子雜交儀VH-1000經(jīng)濟(jì)型、分子雜交儀VH-2000組合型、分子雜交儀VH-4000多功能型。
一般常用的分子雜交中的雜交管規(guī)格如下:
內(nèi)徑×長度: φ 35×75 mm;
內(nèi)徑×長度: φ 35×100 mm;
內(nèi)徑×長度: φ 35×150 mm;
內(nèi)徑×長度: φ 35×200 mm;
內(nèi)徑×長度: φ 35×300 mm;
內(nèi)徑×長度: φ 70×300 mm;
分子雜交管從性能上看對分子雜交儀沒有絲毫影響,只是一個(gè)容器;雜交管從外形看和普通的玻璃管沒多大差別;但是從使用壽命和好壞來看,主要涉及到分子雜交管的加工工藝,雜交管的厚度,特殊的雜交管密封設(shè)計(jì)采用雜交管蓋子雙密封圈,密封更*,防止同位素的泄漏,雜交管采用耐溫玻璃精制而成。
分子雜交儀中的雜交管主要應(yīng)用于:
1 斑點(diǎn)和狹縫雜交
固定在膜上的未分離的DNA或RNA樣本。
Slot blot是做RNA雜交的。“RNA的斑點(diǎn)和狹縫雜交分析能夠不經(jīng)凝膠電泳就直接將RNA樣品點(diǎn)在硝酸纖維素膜或尼龍膜上,然后與放射性標(biāo)記的探針雜交,定性或半定量地測定RNA。最初是由Kafatos等人用于描述RNA的斑點(diǎn)雜交。但由于直接將RNA樣品點(diǎn)在硝酸纖維素膜上會產(chǎn)生圓斑,不便于比較,故人們采用狹槽的裝置點(diǎn)樣,也稱為SlotBlot。
2 菌落/菌斑雜交
從培養(yǎng)的細(xì)菌或噬菌體斑中直接提取DNA并固定在膜上。
3 Southern/Northern雜交
DNA或RNA,通過凝膠電泳進(jìn)行大小分級,然后轉(zhuǎn)移到膜上。
4 Western Blot蛋白質(zhì)印跡雜交
Western Blot是指用抗體檢測吸附在硝化纖維素上的多肽
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