威尼德紫外交聯(lián)儀DNA,RNA,蛋白實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用
威尼德紫外交聯(lián)儀:在Northern blot、Southern blot、EMSA等尼龍膜、硝酸纖維素膜的交聯(lián)、Sterilization(滅菌)、DNA Nicking(DNA缺失)的應(yīng)用
1.Membrane Blotting(膜印跡)
威尼德生物科技(北京)有限公司VL系列紫外交聯(lián)儀可用于Northern、Southern blotting、EMSA等膜交聯(lián),當(dāng)使用254 nm波長(zhǎng)、能量為120.0mJ/cm2交聯(lián)時(shí),尼龍模的氨基和DNA的胸腺嘧啶(或RNA的尿嘧啶)之間形成共價(jià)鍵穩(wěn)定。
(1)將一張或兩張用轉(zhuǎn)移緩沖液(如10×SSC)輕輕潤(rùn)濕的吸水紙放在VL系列紫外交聯(lián)儀的樣品腔。將尼龍膜放在吸水紙上,使附著核酸的一面朝上,使紫外線燈管能夠直接照射核酸。
(2)關(guān)閉VL系列紫外交聯(lián)儀的門(mén)。
(3)按下Run/Pause(運(yùn)行/暫停)按鍵啟動(dòng),當(dāng)紫外線燈管亮時(shí),顯示屏將立即開(kāi)始從輸入值開(kāi)始累計(jì)。如果在曝光期間的任何點(diǎn)打開(kāi)門(mén),照射將停止,并顯示已曝光值。(關(guān)上門(mén)按Run/Pause按鍵繼續(xù)照射。)
(4)輻照完成后,蜂鳴器將鳴響約3–4秒。自動(dòng)交聯(lián)大約需要25–50秒。
(5)取下尼龍膜并關(guān)上門(mén),交聯(lián)完成。每次使用后,清潔紫外線交儀樣品腔,以清除殘留的鹽。威尼德生物科技(北京)有限公司,使用UVA(365nm)、UVB(302 nm)、UVC(254 nm)三種波長(zhǎng)制造了四款紫外交聯(lián)儀,主要包括VL-1000A系列紫外交聯(lián)儀(365nm)、VL-1000B系列紫外交聯(lián)儀(302nm)、VL-1000C系列紫外交聯(lián)儀(254nm)、VL-3000系列紫外交聯(lián)儀(三種波長(zhǎng))滿足不同的科研需求。
2.DNA Nicking(DNA缺失)
威尼德生物科技(北京)有限公司紫外線交聯(lián)儀也可用于切割溴化乙錠染色的瓊脂糖凝膠中的DNA,代替HCl洗滌液,瓊脂糖凝膠中比較大的DNA(>20kb)的轉(zhuǎn)模效率很低,因此DNA在轉(zhuǎn)移到尼龍膜之前需要進(jìn)行前處理。DNA可通過(guò)HCl或紫外線照射進(jìn)行切割。HCl脫嘌呤反應(yīng)較難控制,且對(duì)溫度極為敏感。所以在轉(zhuǎn)移前,在短波長(zhǎng)紫外光(254 nm)中80.0mJ/cm2切割DNA的方法更可靠。威尼德生物科技(北京)有限公司,使用UVA(365nm)、UVB(302 nm)、UVC(254 nm)三種波長(zhǎng)制造了四款紫外交聯(lián)儀,主要包括VL-1000A系列紫外交聯(lián)儀(365nm)、VL-1000B系列紫外交聯(lián)儀(302nm)、VL-1000C系列紫外交聯(lián)儀(254nm)、VL-3000系列紫外交聯(lián)儀(三種波長(zhǎng))滿足不同的科研需求。
3.Sterilization(滅菌)
威尼德生物科技(北京)有限公司VL系列紫外交聯(lián)儀,紫外線殺菌就是通過(guò)紫外線照射,破壞及改變微生物的DNA(脫氧核糖核酸)結(jié)構(gòu),使細(xì)菌當(dāng)即死亡或不能繁殖,達(dá)到殺菌的目的。真正具有殺菌作用的是UVC紫外線,因?yàn)?/span>C波段紫外線很容易被生物體的DNA吸收,尤其是254nm波長(zhǎng)左右紫外線*佳。紫外線殺菌屬于純物理消毒方法,具有簡(jiǎn)單便捷、光譜高效、無(wú)二次污染。因此在短波長(zhǎng)紫外光(254 nm)中滅菌95sec。威尼德生物科技(北京)有限公司,使用UVA(365nm)、UVB(302 nm)、UVC(254 nm)三種波長(zhǎng)制造了四款紫外交聯(lián)儀,主要包括VL-1000A系列紫外交聯(lián)儀(365nm)、VL-1000B系列紫外交聯(lián)儀(302nm)、VL-1000C系列紫外交聯(lián)儀(254nm)、VL-3000系列紫外交聯(lián)儀(三種波長(zhǎng))滿足不同的科研需求。
4.RecA Screening(RecA篩選)
紫外線交聯(lián)劑也可用于篩選RecA突變體,在短波長(zhǎng)紫外光(254 nm)中40.0mJ/cm2照射下,recA突變體阻止了紫外線誘導(dǎo)損傷的修復(fù),阻止了紫外照射過(guò)的過(guò)的recA細(xì)胞的生長(zhǎng)。威尼德生物科技(北京)有限公司,使用UVA(365nm)、UVB(302 nm)、UVC(254 nm)三種波長(zhǎng)制造了四款紫外交聯(lián)儀,主要包括VL-1000A系列紫外交聯(lián)儀(365nm)、VL-1000B系列紫外交聯(lián)儀(302nm)、VL-1000C系列紫外交聯(lián)儀(254nm)、VL-3000系列紫外交聯(lián)儀(三種波長(zhǎng))滿足不同的科研需求。
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