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胞電轉(zhuǎn)染(電轉(zhuǎn))，也叫細胞電穿孔(electroporation)，是把外源大分子物質(zhì)DNA、RNA、siRNA、蛋白質(zhì)等以及一些小分子導(dǎo)入細胞膜內(nèi)部的重要方法。
體外高效電轉(zhuǎn)化儀在瞬間強大電場的作用下，溶液中細胞的細胞膜具有了一定的通透性，帶電的外源物質(zhì)以類似電泳的方式進入細胞膜。由于細胞膜磷脂雙分子層的電阻很大，細胞外部電流場產(chǎn)生的細胞兩極電壓都被細胞膜承受，細胞質(zhì)內(nèi)分到的電壓可以忽略不計，細胞質(zhì)內(nèi)部幾乎沒有電流，因此也決定了正常范圍內(nèi)的電轉(zhuǎn)過程中細胞毒性很小。電場使DNA等物質(zhì)進入細胞膜后只能停止在細胞膜附近，隨后細胞本身的機制可以允許這些物質(zhì)到細胞核等處。
體外高效電轉(zhuǎn)化儀使用：
1.選擇合適的電場強度合適的電場強度對于電轉(zhuǎn)染實驗非常重要，電場強度不能過高，過高會增加細胞的死亡率；也不能過低，過低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同細胞系具有不同的*佳場強值，實驗前應(yīng)測定所轉(zhuǎn)染細胞系的電場強度。
2.細胞的選擇用于電轉(zhuǎn)的細胞一般選取處于對數(shù)生長期的細胞(15代以內(nèi)，傳代后2d)。因為處于對數(shù)生長期的細胞分裂旺盛，表面結(jié)構(gòu)致密比穩(wěn)定期的細胞差，電轉(zhuǎn)后，細胞膜的恢復(fù)能力強，而且處于有絲分裂期的細胞更容易接受外源DNA。
3.質(zhì)粒的質(zhì)量應(yīng)選擇純度高的質(zhì)粒，DNA/RNA應(yīng)該超純(A260/A280>1.8)，其次應(yīng)不含內(nèi)毒素，同時質(zhì)粒應(yīng)溶于雙蒸水而不是TE緩沖溶液。另外，DNA濃度不宜過高。
4.選擇合適的電轉(zhuǎn)染試劑電擊會對細胞造成一定程度的傷害，在轉(zhuǎn)染試劑的選擇上要注意，應(yīng)選擇具有細胞膜修復(fù)成分的電轉(zhuǎn)染試劑，如Entranster-E，可將電擊對細胞的損傷降低。
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