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柱壓過高是液相色譜在使用過程中較常出現(xiàn)的問題，指的是壓力突然升高，一般都是由于流路中有堵塞的原因。此時，我們應(yīng)該分段進行檢查。
1、先斷開真空泵的入口處，此時PEEK管里充滿液體，使PEEK管低于溶劑瓶，看液體是否自由滴下，如果液體不滴或緩慢滴下，則是溶劑過濾頭堵塞。
處理方法：用30%的硝酸浸泡半個小時，在用超純水沖洗干凈。如果液體自由滴下，溶劑過濾頭正常，再檢查;
2、打開Purge閥，使流動相不經(jīng)過柱子，如果壓力沒有明顯下降，則是過濾白頭堵塞。
處理方法：將過濾白頭取出，用10%的異丙醇超聲半個小時。如果壓力降至100 PSI(6.7 Bar)以下，過濾白頭正常，再檢查;
3、把色譜柱出口端取下，如果壓力不下降，則是柱子堵塞。
處理方法：如果是緩沖鹽堵塞，則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強保留的物質(zhì)導(dǎo)致堵塞，則要用比現(xiàn)在流動相更強的流動相沖至壓力正常。假如按上面的方法長時間沖洗壓力都不下降，則可考慮將柱子的進出口反過來接在儀器上，用流動相沖洗柱子。這時，如果柱壓仍不下降，只有換柱子入口篩板，但一旦操作不甚，很容易造成柱效下降，所以盡量少用。
液相色譜儀日常的維護與保養(yǎng)：
1、儲備液（流動相） 首先要使用HPLC級的溶劑和試劑，同時要保持流動相儲存液的清潔，特別是儲液器內(nèi)的過濾頭要定期清洗，必要時進行更換。在使用含有緩沖鹽的流動相后一定要時進行相應(yīng)比例的水和有機溶劑進行充分的沖洗。正反相流動相相互交換時要用互溶的中性溶劑進行中介替換。另外：流動相不可長期儲存，要用多少配多少以防生長微生物和組分改變。
2、泵 泵內(nèi)的密封圈、單向閥、柱塞桿及在線過濾器都是易磨損的部件，特別是密封圈的損壞可引起系統(tǒng)的許多故障。所以有人建議定期更換但也不能一概而論，要看墊圈的材料質(zhì)量，使用壓力的大小以及緩沖液用后的處理情況而定。
3、進樣系統(tǒng) 對進樣器首先注意嚴(yán)禁用尖針頭的針進樣，以防劃壞轉(zhuǎn)子密封墊。另處使用后要充分清洗進樣器，將進樣器內(nèi)沉積的樣品以及無機鹽清洗干凈。對自動進樣器要定期對針定量環(huán)和進樣密封墊進行清潔，更換以保證進樣量的準(zhǔn)確一致。
4、色譜柱 在色譜柱的使用中要注意：①輕拿輕放以防破壞柱內(nèi)固定相的粒子。②在柱前安裝預(yù)柱，防止柱污染，延長色譜柱的使用壽命。③最大限壓不要設(shè)的太高，防止柱壓力過高沖擊過大。④使用的溶劑要符合色譜柱使用的各種要求。
5、檢測器 首先要保證檢測池的清潔，不僅每天用后要對檢測器進行充分的沖洗，而且還要定期的用強溶劑反向沖洗檢測池。另外，檢測器用的燈是有一定壽命的，在清洗泵等其它不用檢測器時可將檢測器關(guān)上。使用脫過氣的流動相，防止池內(nèi)進入氣泡。
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