總RNA提取試劑盒使用注意事項(xiàng)
總RNA提取試劑盒提供了一種快速,簡(jiǎn)單,經(jīng)濟(jì)有效的方法,可從全血,哺乳動(dòng)物細(xì)胞,細(xì)菌細(xì)胞和真菌細(xì)胞中分離總RNA。優(yōu)化的洗滌劑和離液鹽用于裂解細(xì)胞并滅活核糖核酸酶。專(zhuān)門(mén)的高鹽緩沖系統(tǒng)允許RNA物質(zhì)基團(tuán)結(jié)合到旋轉(zhuǎn)柱的玻璃纖維基質(zhì)上,同時(shí)使污染物通過(guò)柱被有效地洗去。純的RNA用RE緩沖液洗脫,不用酚提取或醇沉淀。
總RNA提取試劑盒使用注意事項(xiàng)如下:
1、如果需要測(cè)量RNA的A260/A280的比值,建議使用RNA定量緩沖液對(duì)樣品稀釋后,進(jìn)行測(cè)量。
2、所有離心管,槍頭及相關(guān)溶液都必須無(wú)RNA酶污染。耐高溫器物可180°C烘烤4小時(shí)以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過(guò)夜,然后滅菌,烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%DEPC至重蒸水或MiliQ級(jí)水中,處理過(guò)夜,滅菌即成DEPC水。
3、使用凍存的細(xì)胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細(xì)胞或組織差一些。因?yàn)樵诩?xì)胞或組織凍融過(guò)程中一些細(xì)胞或組織內(nèi)的RNase會(huì)被釋放出來(lái)并剪切樣品。如果不能及時(shí)抽RNA,推薦先加入適量Trizol,并裂解樣品后凍存。
4、必須戴一次性手套操作,且盡量不要對(duì)著RNA樣品呼氣或說(shuō)話,以防RNA酶污染。建議戴一次性口罩操作。
5、Trizol含有毒物質(zhì)苯酚,避免接觸皮膚或吸入。為防止濺入眼睛,請(qǐng)戴防護(hù)眼鏡或使用透明保護(hù)屏。如皮膚接觸Trizol,請(qǐng)立即用大量去垢劑和水沖洗,如仍有不適,請(qǐng)聽(tīng)取醫(yī)生意見(jiàn)。
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