研磨儀可以快速高效地進(jìn)行干磨、濕磨和冷凍磨,以獲得均勻細(xì)碎的樣品,也可以進(jìn)行細(xì)胞破碎,方便后續(xù)的DNA/RNA/蛋白質(zhì)提取實(shí)驗(yàn)。因此,它的應(yīng)用不僅解決了以往人工研磨存在的諸多問題,也為開展各種研究實(shí)驗(yàn)提供了諸多便利。在操作之前,我們一定要做好相關(guān)的準(zhǔn)備工作。
樣品從進(jìn)料口進(jìn)入,首先,通過旋刀的初級(jí)磨削對(duì)其進(jìn)行預(yù)處理。然后,樣品在離心力的作用下向轉(zhuǎn)刀外緣移動(dòng),進(jìn)入轉(zhuǎn)刀與環(huán)網(wǎng)之間,通過擠壓、剪切和摩擦進(jìn)行二次研磨。當(dāng)樣品尺寸小于環(huán)網(wǎng)孔徑尺寸時(shí),樣品將進(jìn)入采集裝置。因此,通過旋轉(zhuǎn)刀環(huán)篩網(wǎng)系統(tǒng)的二次研磨,確保儀器能夠在極短的時(shí)間內(nèi)輕柔、高效地制備樣品。
樣品預(yù)處理前,研磨儀應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備好所需的實(shí)驗(yàn)組織研磨機(jī),準(zhǔn)備冰塊和液氮進(jìn)行預(yù)冷處理,并配制75%乙醇溶液對(duì)實(shí)驗(yàn)設(shè)備進(jìn)行殺菌消毒,以盡可能多地去除??梢员苊飧鞣N酶不影響后續(xù)實(shí)驗(yàn);實(shí)驗(yàn)操作前將PBS緩沖液預(yù)冷至4℃,這是實(shí)驗(yàn)過程所必需的。將樣品切成小塊,放入離心管中,加入滅菌后的研磨球,但要避免液體飛濺造成樣品污染。
設(shè)備在運(yùn)行過程中,由于沖擊和摩擦?xí)a(chǎn)生大量熱量,導(dǎo)致離心管溫度升高。因此,還需要選擇具有低溫控制功能的研磨設(shè)備,或者將適配器放入液氮中進(jìn)行預(yù)冷,以減少研磨時(shí)間,避免高溫?fù)p壞樣品組件。
那么我們要如何使用研磨儀?
1、將儀器置于干燥通風(fēng)的環(huán)境中,插上電源,觀察儀器控制顯示是否正常亮起。打開儀器,測(cè)試控制按鈕是否可以正常使用,儀器空載運(yùn)行時(shí)是否有異響。
2、將適量的樣品和研磨球放入球磨罐中,注意不要裝滿,并預(yù)留一定的研磨空間。研磨時(shí),建議樣品和研磨球各占球磨罐容積的三分之一。
3、如需預(yù)凍,可將裝有樣品的球磨罐放入液氮環(huán)境中冷卻3分鐘以上,然后裝入儀器進(jìn)行研磨。使用液氮預(yù)凍時(shí),應(yīng)采取防護(hù)措施,防止凍傷。
4、將球磨罐放入高通量組織粉碎機(jī)的夾具中,慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)輪,用自動(dòng)中心定位的緊固裝置固定球磨罐,蓋上蓋子。
5、在控制顯示屏上設(shè)置研磨機(jī)的運(yùn)行時(shí)間和擺動(dòng)頻率,開始研磨。研磨完成后,轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)輪即可將球磨機(jī)拆下。
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