實(shí)驗(yàn) bug 頻發(fā),這個(gè)移液錯(cuò)誤你中招了嗎?
「正確移液」聽(tīng)上去像是每個(gè)實(shí)驗(yàn)人早已學(xué)會(huì)的基本操作,但實(shí)際上:
● 每次打出液體后,吸頭內(nèi)還殘留了部分液體;
● 檢測(cè)實(shí)驗(yàn),加樣操作按標(biāo)準(zhǔn)來(lái),但是卻總是污染;
● 處理樣本,提取 RNA/DNA 時(shí),效率極低;
● 明明用的是全自動(dòng)的移液工作站,但是移液卻不夠精確。
而造成這一切的「真兇」往往是最讓人忽視的存在——移液吸頭。
你一定在想:只要能裝上的吸頭就是能用的吸頭吧,其實(shí)不然,低質(zhì)量吸頭不僅會(huì)讓殘留的污染影響到樣品,大量液體殘留,還會(huì)造成移液誤差,很多科研人的實(shí)驗(yàn)就敗在了這一步。如果移液器與吸頭匹配使用精確度不佳,會(huì)影響到移液系統(tǒng)的密封性以及精準(zhǔn)性。那么如何來(lái)挑選合適的耗材呢?大家在吸頭選擇上可以參考以下幾點(diǎn):
一、按照實(shí)驗(yàn)需求,選擇吸頭類(lèi)型和功能
● 當(dāng)樣品體積未知或不一致時(shí)體積不均一,檢測(cè)動(dòng)物或環(huán)境液體樣本時(shí)(如血液,尿液,拭子,水質(zhì)等樣本),需要使用黑色導(dǎo)電吸頭。導(dǎo)電吸頭能檢測(cè)到其何時(shí)插入樣品,何時(shí)停止,防止過(guò)深插入樣品導(dǎo)致樣品溢出容器,污染整個(gè)工序;
● 當(dāng)樣本體積一致,且實(shí)驗(yàn)無(wú)特殊需求時(shí),選擇標(biāo)準(zhǔn)吸頭即可;
● 避免交叉污染或保護(hù),應(yīng)使用帶濾芯的吸頭;
● 防止實(shí)驗(yàn)中的 RNA/DNA 被降解引起結(jié)果錯(cuò)誤,應(yīng)該使用無(wú) RNA/DNA 酶的槍頭;
●對(duì)于靈敏度要求高,或者易殘留的珍貴樣本時(shí),應(yīng)該適應(yīng)低吸附吸頭,提升回收率。
二、吸頭準(zhǔn)確度判斷
良好的吸頭氣密性能夠保證工作站發(fā)出的指令被完/美執(zhí)行,是吸頭選擇的重點(diǎn)指標(biāo),可以通過(guò)吸取液體后懸停的方法,來(lái)判斷氣密性;
吸頭不能夠出現(xiàn)掛液現(xiàn)象,掛液會(huì)造成移液不準(zhǔn)確??梢酝ㄟ^(guò)試用的方式,進(jìn)行吸頭測(cè)試。
三、判斷吸頭的品質(zhì)
吸頭添加劑:吸頭在制作過(guò)程中會(huì)加入顯色劑、脫模劑等化學(xué)物質(zhì),添加劑越多對(duì)移液造成的影響就越大,因此需要選擇添加劑少的吸頭;
生物污染:槍頭需要保證對(duì)存在的生物污染都已經(jīng)處理干凈,吸頭生/產(chǎn)商應(yīng)該出具相應(yīng)的檢查報(bào)告,以確保對(duì)實(shí)驗(yàn)不存在影響;
在選擇導(dǎo)電吸頭時(shí),需要特別注意其導(dǎo)電性,導(dǎo)電性良好的吸頭才能準(zhǔn)確檢測(cè)液面,避免移液失敗和樣本污染。
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