方法選擇合適色譜柱，流動相A為水，流動相B為乙腈，梯度洗脫0～3min，檢測波長260nm，柱溫35℃，進樣量10μL。以保留時間定性，峰面積定量，計算蟲草素含量。精密量取蟲草素對照品4.76mg，置入10mL量瓶，加水適量，使溶解，用水稀釋至刻度，制成濃度為0.476mg／mL的對照品貯備液，取貯備液1.0mL，置入10mL量瓶，加水定容至10mL，得濃度47.6μg／mL的蟲草素對照品溶液。

準(zhǔn)確稱取冬蟲夏草1g，用1％乙酸溶液浸泡過夜，37℃超聲提取30min，過濾，收集濾液并用1％乙酸溶液定容至10mL。取2mL，加入乙腈2mL，沉淀蛋白，離心，取上清凍干，加水1mL溶解，0.45lam微孔濾膜濾過得到供試品溶液，待測。

供試品溶液進樣測定，得到色譜峰。對線性關(guān)系精密度、重復(fù)性穩(wěn)定性依次進行檢測。以進樣濃度為橫坐標(biāo)(x)，峰面積為縱坐標(biāo)(y)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程和相關(guān)系數(shù)得到在范圍內(nèi)的濃度與峰面積呈良好線性關(guān)系，計算蟲草素的峰面積RSD表明實驗的精密度良好穩(wěn)定性質(zhì)良好。

準(zhǔn)確稱取已知蟲草素含量的冬蟲夏草樣品6份，分別精密加入47.6μg／mL的蟲草素對照品溶液0.5mL，將供試品溶液，按調(diào)試好的色譜條件測定，計算回收率。取冬蟲夏草藥材，將供試品溶液，按調(diào)試好的色譜條件測定。得到不同產(chǎn)地冬蟲夏草蟲草素的含量。

利用蟲草素的理化性質(zhì)，方法選用乙腈-水作為流動相系統(tǒng)，梯度洗脫分離蟲草素，可以將蟲草素與雜質(zhì)進行很好的分離，色譜峰的對稱度和分離度較好，峰形窄且對稱。高效液相色譜技術(shù)不斷發(fā)展成熟，相關(guān)的檢測研究日漸增多。實驗室遵照ISO17025和GMP進行實驗室管理，專注為藥品生產(chǎn)過程中可能產(chǎn)生的雜質(zhì)提供評估報告、方法開發(fā)、驗證及樣品檢測等一系列完整的解決方案。更多檢測問題歡迎私信及評論區(qū)留言！

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