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極性較大的化合物在分析測試過程中，通常在常規(guī)非極性柱上保留很弱，即便有機相比例降到很低，也很難實現(xiàn)保留增強，易受空白溶劑或空白輔料的干擾，于是排除干擾就成了方法設(shè)定中很重要的一個環(huán)節(jié)。
應(yīng)用實例
氨基丁酰胺的極性大，紫外吸收弱，在常規(guī)C18柱上幾乎無保留，輔料空白對其測定有干擾。
結(jié)構(gòu)如圖所示：
原條件
色譜柱：Ultimate® AQ-C18（4.6×250mm，5μm）。
流動相：磷酸鹽緩沖液：乙腈=95：5；
分析
目標峰極性大，在C18柱上無保留，在3分鐘左右出峰，與輔料空白重合，無法分離。
藍色—輔料峰 黑色—目標物
方法開發(fā)思路
要使目標物質(zhì)與輔料分離，必須增強目標化合物的保留能力。該物質(zhì)結(jié)構(gòu)上有兩個氨基，可考慮流動相中加離子對試劑的模式測定，結(jié)合其檢測波長（205nm），可選擇在流動相體系中加入十二烷基硫酸鈉進行測定，通過方法調(diào)整優(yōu)化，可排除空白輔料對雜質(zhì)的干擾。
調(diào)整后的色譜條件
色譜柱：Ultimate® XB-C18（4.6×250mm，5μm）。
流動相：0.01mol/L磷酸二氫鉀+0.5g/L十二烷基硫酸鈉（pH2.5）/乙腈=70/30。
分析
與預(yù)期一致，目標化合物的保留在該體系下增強明顯，不受輔料空白影響，可實現(xiàn)較好的保留與分離。
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