Diol二醇基色譜柱平時(shí)在反相條件下使用是怎樣的?
Diol二醇基色譜柱是硅膠填料的替代物,與相應(yīng)的硅膠填料相比,它的平衡時(shí)間更短,而選擇性相似。由于這種填料的活性較低,它還可以應(yīng)用在體積排阻色譜中。二醇基柱主要可用于多肽、蛋白以及極性藥物分子等的分離。
二醇基結(jié)合色譜柱在正相系的分析中,可以獲得高于色譜柱的保留容量。且由于其化學(xué)鍵合了與硅膠有著不同性質(zhì)的羥基,因此在正相分析下,其填充劑的選擇范圍相對(duì)更大采用了*的化學(xué)處理技術(shù),從而實(shí)現(xiàn)了穩(wěn)定的化學(xué)修飾。
為此,其同樣可以放心地使用于正相制備HPLC中。此外,與硅膠有所不同的是,由于它可以通入水洗提液,因此能夠較容易地清洗掉吸附于色譜柱上的極性雜質(zhì)成分。
Diol二醇基色譜柱平時(shí)在反相條件下使用:
緩沖鹽應(yīng)及時(shí)沖洗,以及不能直接用純甲醇沖洗緩沖鹽等,屬常識(shí)就不作特別交待了。
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用50倍純甲醇沖洗;之后,用異丙醇過(guò)渡后,用二氯甲烷沖洗色譜柱;之后,再用異丙醇過(guò)渡回來(lái)到甲醇條件下。
這些清洗方法,主要是針對(duì)當(dāng)樣品中有雜質(zhì)逐步吸附累積到填料上時(shí)的處理方法,色譜柱表現(xiàn)行為為諸如柱壓增高柱效降低等。
其他一些通用小技巧如調(diào)轉(zhuǎn)柱子低流速?zèng)_洗,在污染物累積在柱頭時(shí)是比較有效的,不再贅述。
最后,仍然建議:在實(shí)驗(yàn)室中做好定期柱效檢測(cè)工作,是重要而有意義的。
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