酶標記抗體(Enzyme Antibody Conjugates)
酶標記抗體,是一類廣泛用于免疫學、分子生物學及臨床醫(yī)學的各個分支學科中的特異、敏感和安全的免疫化學制劑。目前
較為常用的是將辣根過氧化物酶(HRP),經(jīng)過碘酸鈉氧化而標記在抗體IgG分子上,而制成HRP—抗體結(jié)合物。
本室向用戶提供的各類酶標物,均根據(jù)本室建立的改良過碘酸鈉氧化法標記而成。每種成品已加入一定濃度的BSA作為穩(wěn)定
劑。產(chǎn)品的工作濃度根據(jù)方法不同而別,用前-20℃凍存,避免反復化凍。
應用范圍:
抗原決定族的抗原性分析鑒定,各種抗原、抗體的定量、定性及定位分析測定等。
工作中易產(chǎn)生的問題:
1.包被抗體或抗原不適,易產(chǎn)生陽性值較小,或產(chǎn)生變異,即跳管現(xiàn)象。
2.用抗血清不純化,或純化程度太低的抗體包被,則陽性值較小,或沒有陽性梯度。
3.封閉不好或標記物過濃可產(chǎn)生對照較高。
主要性能:
每支0.1ml液體,內(nèi)含有HRP約200μg/支,IgG約含400μg/支,BSA300μg/支,-20℃保存,穩(wěn)定一年。4℃保存約3~6
個月,1:10稀釋,4℃可30天左右。稀釋液為:pH7.4 PBST。
工作效價:
直接ELISA法:1:500~1:1000,1:500~2000,用TMB作底物(OD450nm)P/N=2.5~3.0為陽性。
免疫印跡法:1:200~400,免疫組化:1:20~40,斑點免疫1:200~400。
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