高效液相色譜是一種廣泛使用的分析分離技術(shù),用于定量、鑒定和分離非揮發(fā)性液體混合物的成分。HPLC色譜柱里面有各種孔徑的“填料”,稱為“固定相”。經(jīng)過孔的樣品被稱為“流動(dòng)相”。當(dāng)流動(dòng)相到達(dá)固定相時(shí),大分子會(huì)被較小的孔截?cái)r,從而使較小的分子可以更快更好地洗脫,這就是分離過程。這導(dǎo)致較小分子具有更快的保留時(shí)間,分子在色譜柱中停留的時(shí)間越長(zhǎng),色譜圖上的峰越寬。
溶劑過濾器是化學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用的裝置,主要應(yīng)用于高效液相色譜流動(dòng)相過濾、粒子物質(zhì)分析和微生物污染檢測(cè)等,也是化學(xué)實(shí)驗(yàn)室常備器材。恒譜生流動(dòng)相過濾器可以保護(hù)HPLC 系統(tǒng)免受流動(dòng)相中小顆粒的影響。溶劑入口過濾器由316不銹鋼制成,適用于大多數(shù)溶劑,安裝和使用簡(jiǎn)單,維護(hù)方便,組裝性好。
HPLC 主要分為 3個(gè)類型:正相高效液相色譜、反相高效液相色譜和超高效液相色譜
一、正相高效液相色譜
正相高效液相色譜使用非極性溶劑作為流動(dòng)相,以硅膠顆粒作為固定相。在普通 HPLC中與非極性化合物相比,極性化合物在固定相中與極性有機(jī)硅的粘附時(shí)間更長(zhǎng)。因此,非極性化合物在普通 HPLC中洗脫得更快。
二、反相高效液相色譜
反相高效液相色譜是最為常見的類型。在反相高效液相色譜中固定相被烴鏈修飾會(huì)導(dǎo)致色譜柱變?yōu)榉菢O性。極性分子會(huì)與溶劑產(chǎn)生吸引力從而會(huì)更快地洗脫。
三、超高液相色譜
超高效液相色譜的運(yùn)行速度比高效液相色譜更快、所用的溶劑更少且分辨率更高。色譜柱比較小,所以固定相顆粒的尺寸也比較小。小孔可以更好的促進(jìn)分子分離,較短的色譜柱還可以快速檢測(cè)。但是UHPLC不能用于干燥或未過濾的樣品,因?yàn)檩^小的孔會(huì)堵塞。
恒譜生C18色譜柱采用了粒徑高度均一的高純硅膠基球,具備精準(zhǔn)控制的粒徑和孔道結(jié)構(gòu),同時(shí)先進(jìn)成熟的表面鍵合和*封端工藝使硅羥基活性下降,能夠適用于分離具有不同疏水性的分析物,是用途廣泛的通用型硅膠色譜柱。具有色譜性能優(yōu)異、選擇性好、重現(xiàn)性佳和應(yīng)用范圍廣等特性。
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