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生物學(xué)實(shí)驗(yàn)之線粒體組學(xué)－線粒體膜電位檢測(cè)技術(shù)服務(wù)的實(shí)驗(yàn)原理
技術(shù)原理
JC-1 是一種廣泛用于檢測(cè)線粒體膜電△Ψm位的理想熒光探針。JC-1染料以電勢(shì)依賴性的方式積聚在線粒體內(nèi)，可以用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。正常線粒體內(nèi)，JC-1聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物，聚合物發(fā)出強(qiáng)烈的紅色熒光（Ex=585 nm, Em=590 nm）；不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失，JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中，產(chǎn)生綠色熒光（Ex=514 nm, Em=529 nm）。JC-1不僅可用于定性檢測(cè)，因顏色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。也可以用于定量檢測(cè)，因線粒體的去化程度可以通過(guò)紅/綠熒光強(qiáng)度的比例來(lái)衡量。
實(shí)驗(yàn)方法
Step1：細(xì)胞培養(yǎng)
Step2：轉(zhuǎn)染或藥物處理
Step3：細(xì)胞收集
Step4：加 JC-1 試劑
Step5：上機(jī)檢測(cè)
案例展示
流式檢測(cè)線粒體膜電位
實(shí)驗(yàn)周期及交付標(biāo)準(zhǔn)
1. 實(shí)驗(yàn)周期：2-3周
2. 交付標(biāo)準(zhǔn)：流式檢測(cè)圖、比值、原始數(shù)據(jù)、實(shí)驗(yàn)報(bào)告（實(shí)驗(yàn)步驟、試劑、儀器）
需確認(rèn)的信息
1. 樣本的種屬及類型（組織還是細(xì)胞）
2. 樣本數(shù)量
3. 是否提供探針
4. 拍照要求、分析要求
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