在制藥行業(yè)，特別是注射用藥行業(yè)，細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)為重要質(zhì)控檢測(cè)項(xiàng)。根據(jù)反應(yīng)原理，內(nèi)毒素檢測(cè)方法可分為以下4種：凝膠法、濁度法、顯色法和重組C因子法。除重組C因子外，其余方法都依賴于鱟血。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，并基于對(duì)鱟資源的保護(hù)，重組C因子法更具有適用性。

重組C因子的廣泛應(yīng)用與各國(guó)的法規(guī)狀態(tài)密切相關(guān)。目前重組C因子已經(jīng)被主流藥典所認(rèn)可， 歐洲藥典已將重組C因子寫入其2.6.32章節(jié)，其余各國(guó)藥典對(duì)重組C因子的評(píng)估項(xiàng)目也在不斷推進(jìn)。近期，Lonza 應(yīng)美國(guó)藥典(USP)的要求進(jìn)行了一項(xiàng)研究，用于將重組C因子內(nèi)毒素檢測(cè)方法收錄美國(guó)藥典。以下是關(guān)于美國(guó)藥典對(duì)重組C因子評(píng)估的數(shù)據(jù)更新。

實(shí)驗(yàn)方案

• 收集碳床處理后水樣，并對(duì)該樣品中的葡聚糖和內(nèi)毒素含量進(jìn)行測(cè)定。

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• 根據(jù)測(cè)試結(jié)果，使用碳床處理后含內(nèi)毒素水樣對(duì)阿昔洛韋、慶大霉素、胰島素以及生理鹽水IV進(jìn)行加標(biāo)。

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• 分別使用動(dòng)態(tài)濁度法、動(dòng)態(tài)顯色法、重組c因子法（兩個(gè)廠家的試劑）對(duì)樣品進(jìn)行干擾測(cè)試。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

阿昔洛韋

阿昔洛韋樣品中本土內(nèi)毒素加標(biāo)量為3.5 EU/mL，可接受的檢測(cè)范圍為1.75EU/mL-7EU/mL（圖中陰影部分表示）。如圖1所示，動(dòng)態(tài)濁度法、動(dòng)態(tài)顯色法，PyroGene 重組C因子試劑均可用于該樣品內(nèi)毒素檢測(cè)。

慶大霉素

慶大霉素樣品中本土內(nèi)毒素加標(biāo)量為0.7EU/mL，可接受的檢測(cè)范圍為0.35EU/mL-1.4EU/mL（圖中藍(lán)色陰影部分表示）。如圖2所示，動(dòng)態(tài)濁度法，PyroGene 重組C因子試劑可用于該樣品內(nèi)毒素檢測(cè)。

胰島素

胰島素樣品中本土內(nèi)毒素加標(biāo)量為3.5 EU/mL，可接受的檢測(cè)范圍為1.75EU/mL-7EU/mL（圖中藍(lán)色陰影部分表示）。如圖3所示，動(dòng)態(tài)濁度法，PyroGene 重組C因子，rFCII重組C因子試劑可用于該樣品內(nèi)毒素檢測(cè)。

生理鹽水IV

生理鹽水IV中內(nèi)毒素加標(biāo)量為0.125 EU/mL，可接受的檢測(cè)范圍為0.0625EU/mL-0.25 EU/mL（圖中藍(lán)色陰影部分表示）。如圖4所示，動(dòng)態(tài)濁度法，動(dòng)態(tài)顯色法和重組C因子法可用于該產(chǎn)品的檢測(cè)。

總結(jié)

以上結(jié)果顯示，重組C因子與基于LAL的測(cè)試方法具有可比性。使用PyroGene 重組C因子產(chǎn)品進(jìn)行的4種產(chǎn)品內(nèi)毒素檢測(cè)時(shí)，結(jié)果均在可接受范圍以內(nèi)。對(duì)于具體產(chǎn)品的方法選擇，可以根據(jù)產(chǎn)品的性質(zhì)來(lái)進(jìn)行確定。