細(xì)胞培養(yǎng)為何需要在CO2培養(yǎng)箱中？二氧化碳不僅是細(xì)胞生長的必需成分，還與維持培養(yǎng)液的pH有關(guān)。

細(xì)胞的體外培養(yǎng)需要理想的氣體環(huán)境，氧氣、二氧化碳是細(xì)胞生存的必要條件。氧氣參與細(xì)胞的三羧酸循環(huán)，為細(xì)胞生存、代謝與合成提供能量；二氧化碳既是細(xì)胞的代謝產(chǎn)物，是細(xì)胞生長的必需成分，又與維持培養(yǎng)液的pH有關(guān)。大多數(shù)細(xì)胞適宜的pH范圍往往是7.2～7.4。在開放式培養(yǎng)中，以5%的二氧化碳?xì)怏w比例為宜。

細(xì)胞污染的預(yù)防

①實(shí)驗(yàn)用品防止污染。細(xì)胞培養(yǎng)所用試劑、耗材、器材的清洗、消毒要徹/底，各種溶液滅菌要仔細(xì)，并在無菌實(shí)驗(yàn)檢測陰性后才能使用。操作室及剩余的無菌器材要定期清潔、消毒、滅菌。

②操作過程防止污染。

③穿著容易起靜電或吸附灰塵的衣物必須更換為白大褂后才能進(jìn)入細(xì)胞間。

④實(shí)驗(yàn)開始前需要確定戴的手套沒有問題，只要接觸過生物安全柜之外的物品，必須及時(shí)對手套進(jìn)行消毒。

⑤不要從敞開的容器口上方經(jīng)過，以避免衣服上掉落不明物體對細(xì)胞的污染。

⑥細(xì)胞操作時(shí)動(dòng)作要輕，必須在火焰周圍無菌區(qū)內(nèi)打開瓶口，并將瓶口放在火焰周圍簡單轉(zhuǎn)動(dòng)燒灼，注意不要讓火焰把塑料瓶口燒化。

⑦瓶蓋應(yīng)當(dāng)?shù)狗旁谶h(yuǎn)離自己的地方，以避免瓶蓋被誤操作所污染。