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紫外可見分光光度計是利用物質對不同波長光的選擇吸收現(xiàn)象來進行物質的定性和定量分析，通過對吸收光譜的分析，判斷物質的結構及化學組成。
許多有機化合物在紫外區(qū)具有特征的吸收光譜，因此可用分光光度計法對有機物質進行定性鑒定，結構分析及定量測定，其基本工作原理和紅外光譜儀相似，利用一定頻率的紫外可見光照射被分析的有機物質，引起分子中價電子的躍遷，它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長而變化的光譜，反映了試樣的特征。在紫外可見光的范圍內，對于一個特定的波長，吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度，因此測量光譜可以進行定性分析，而且根據(jù)吸收與已知濃度的標樣的比較，還能進行定量分析。
紫外可見分光光度計在各種不同行業(yè)的應用：
1、氫鍵強度的測定
不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度也不同，這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度，以確定選擇哪一種溶劑。
2、比較吸收波長吸收系數(shù)的一致性
由于紫外吸收光譜只含有2～3個較寬的吸收帶，而紫外光譜主要是分子內的發(fā)色團在紫外區(qū)產(chǎn)生的吸收，與分子和其它部分關系不大。具有相同發(fā)色團的不同分子結構，在較大分子中不影響發(fā)色團的紫外吸收光譜，不同的分子結構有可能有相同的紫外吸收光譜，但它們的吸收系數(shù)是有差別的。如果分析樣品和標準樣品的吸收波長相同，吸收系數(shù)也相同，則可認為分析樣品與標準樣品為同一物質。
3、檢定物質
根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收，特別是吸收波長λmax和摩爾吸收系數(shù)ε，是檢定物質的常用物理參數(shù)。
4、絡合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定
金屬離子常與有機物形成絡合物，多數(shù)絡合物在紫外可見區(qū)是有吸收的，可以利用分光光度法來研究其組成。
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