流式熒光,又稱懸浮陣列、液相芯片等,是近20多年逐漸發(fā)展起來的多指標聯(lián)合診斷技術(shù)。
該技術(shù)以熒光編碼微球為核心,集流式原理、激光分析、高速數(shù)字信號處理等多種技術(shù)于一體,多指標并行分析,最多可一管同時準確定量檢測2-500種不同的生物分子。具有高通量、高靈敏度、并行檢測等特點。可用于免疫分析、核酸研究、酶學(xué)分析、受體、配體識別分析等多方面、多領(lǐng)域的研究。
流式熒光檢測技術(shù)有什么技術(shù)特點?
1、高通量:將許多種不同熒光編碼的微球放在同一反應(yīng)體系內(nèi),一次可同時檢測2-500種生理病理指標,這與傳統(tǒng)方法的逐個檢測相比是質(zhì)的飛躍。
2、高敏感性:流式熒光技術(shù)最高的檢測下限可達0.01 pg/ml,常規(guī)的酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)僅為μg級,比后者檢測的靈敏度提高10—100倍。
3、線性范圍寬:檢測的線性范圍比常規(guī)的ELISA方法高10倍以上,可達3-5個數(shù)量級。檢測濃度范圍為pg-μg級。
4、反應(yīng)快速:因流式熒光技術(shù)的雜交或免疫反應(yīng)在懸浮的液相中進行,反應(yīng)所需的時間短(從2 h縮短到20—40 min),雜交后常不用清洗,即可直接讀數(shù),所以檢測效率高于固相雜交。
5、重復(fù)性好:雜交發(fā)生在準均相液體環(huán)境中,其結(jié)果穩(wěn)定,重復(fù)性非常好。檢測時,抽取其中的100顆微球讀數(shù),最終的數(shù)據(jù)取其均值或中位值,這樣可將誤差減到最小。
6、利于探針和被檢測物的充分反應(yīng):由于液相環(huán)境更有利于保持蛋白質(zhì)的天然構(gòu)象,所以也更有利于探針和被檢測物的反應(yīng)。
7、操作簡便:流式熒光技術(shù)平臺的整個反應(yīng)過程只涉及加樣和孵育,最后上機讀數(shù),操作步驟少,簡單易用。
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