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如何對超微量分光光度計進行有效測量

來源:上海沃元科技有限公司   2022年11月12日 13:48  
  超微量分光光度計是精密光學儀器,出廠前經(jīng)過精細的裝配和調(diào)試,如果能對儀器進行恰當?shù)木S護和保養(yǎng),不僅能保證儀器的可靠性和穩(wěn)定性,也可以延長儀器使用壽命。
  設(shè)備出現(xiàn)問題的幾率并不高,尤其是當設(shè)備正常使用和日常維護時,更多的問題可能由外部因素導(dǎo)致,如樣品的均質(zhì)、顆粒物或氣泡干擾等。要定期對超微量分光光度計進行測量,這樣才能有效避免儀器發(fā)生故障問題。
  標準品測量
  常用的標準品可使用BSA或核酸標準品,可從各試劑廠家購買,或使用如BCA定量試劑盒,QUBIT核酸定量試劑盒中的標準品。請注意標準品一定要在效期之內(nèi),且保存得當(通常低溫)。也可以使用設(shè)備廠家提供的小分子化合物標準品,如Implen提供的PHP標準品。標準品是有等級區(qū)分的,通常附帶有檢定證書的標準品,標稱濃度會更準確。
  特別指出的是,使用未知濃度的樣品,來評估不同設(shè)備的測量結(jié)果,并以其中一臺作為基準,判定另外一臺的準確性,是錯誤的。
  重復(fù)性測量
  在缺乏標準品,或標準品由于保存不當狀態(tài)已存疑時,可使用未知濃度樣品做重復(fù)性測試。這可以判斷設(shè)備的穩(wěn)定性,以排除一些潛在問題,如樣品臺損壞、樣品的非均質(zhì),成分干擾等。雖然不能確定準確性誤差,但重復(fù)性很好的設(shè)備,很大幾率是沒有大問題的。當然,這需要結(jié)合您的允差要求,綜合考量。
  梯度稀釋測量
  使用已知濃度或未知濃度的樣品,均可進行梯度稀釋測量,以驗證設(shè)備的線性穩(wěn)定性。使用設(shè)備的標準曲線功能可便捷地完成此項測試,并給出線性回歸。當梯度稀釋的R2趨近于1,設(shè)備的線性可滿足廣泛的動態(tài)范圍內(nèi)的測量要求,同時也可反映設(shè)備的良好狀態(tài)。需要注意的是,梯度稀釋時一定要選擇定期校準過的,準確性好的移液器,且正確操作。
  基線穩(wěn)定性測量
  光源和CCD檢測器,作為設(shè)備的核心組件,其穩(wěn)定性對于設(shè)備而言是非常重要的,而基線測量可以很好地反映這些部件的狀態(tài)。使用水(或空氣)作為空白,并且用水(或空氣)作為樣品,做多次重復(fù)測量,如果吸光值的漂移很小,通??煞从吃O(shè)備的光學系統(tǒng)組件狀態(tài)正常。
  基線穩(wěn)定性測量
  光源和CCD檢測器,作為設(shè)備的核心組件,其穩(wěn)定性對于設(shè)備而言是非常重要的,而基線測量可以很好地反映這些部件的狀態(tài)。使用水(或空氣)作為空白,并且用水(或空氣)作為樣品,做多次重復(fù)測量,如果吸光值的漂移很小,通??煞从吃O(shè)備的光學系統(tǒng)組件狀態(tài)正常。

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