毛細(xì)管凝膠電泳儀將凝膠電泳儀對(duì)生物大分子的分離能力與毛細(xì)管電泳儀的快速、微量和定量分析相結(jié)合,是當(dāng)今分離度高的一種分離技術(shù)。將聚丙烯酰胺等在毛細(xì)管中交聯(lián)生成凝膠,以凝膠作為載體進(jìn)行電泳,凝膠具有多孔性,類似分子篩的作用,樣品分子按大小分離。
電泳儀的毛細(xì)管柱制備方法如下:
1.檢測(cè)窗口制備:
毛細(xì)管的聚酰亞胺涂層不透明,檢測(cè)窗口部位的聚酰亞胺必須剝離除去,剝離長(zhǎng)度為2-3mm。常用剝離方法有硫酸腐蝕法、灼燒法和刀片刮除法。
2.毛細(xì)管內(nèi)壁修飾:
用120℃熱空氣吹,然后用室溫氨氣沖洗2h,再用50%3-甲基丙烯酰氧丙基-三甲氧基硅烷充滿12h,后用甲醇和水沖洗。
3.緩沖溶液制備:
將1.1g Tris和0.01g EDTA溶于100mlL 7M尿素溶液中,用NaH2PO4調(diào)至pH=8.6。
4.單體溶液制備:
將29g丙烯酰胺和1g N-甲叉雙丙烯酰胺溶解在100mlL緩沖溶液中。
5.催化劑制備:
將0.2g過硫酸銨溶于2mL緩沖溶液中。
6.凝膠溶液制備:
將10mlL單體溶液加入到30mlL緩沖溶液中,用4μL催化劑溶液和2.5μL四甲基乙二胺(TEMED)預(yù)聚合45min。
7.灌注聚合:
將上述凝膠溶液注入毛細(xì)管到無氣泡,將柱兩端浸入緩沖溶液中聚合數(shù)小時(shí)。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。