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單核細胞增生李斯特氏菌的培養(yǎng)特性與生化反應!

來源:上海遠慕生物科技有限公司   2022年11月30日 11:51  

單核細胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)簡稱單增李斯特菌,革蘭氏陽性小桿菌,大小為(0.4-0.5)μm×(0.5-2)μm,直或稍彎,多數(shù)菌體一端較大,似棒狀,常呈V字型排列,有的呈絲狀,偶爾可見雙球狀。在22℃-25℃環(huán)境可形成4根鞭毛。本菌對理化因素抵抗力較強。在士壤、糞便、青貯飼料和干草內能長期存活:對堿和鹽抵抗力強,對青/霉素、氨芐青/霉素、四環(huán)素、磺胺等均敏感。本菌營養(yǎng)要求不高,兼性厭氧。菌落初期極小,水滴樣,經(jīng)37℃數(shù)天培養(yǎng)后,直徑可達2mm,初期菌落光滑、透明,后變灰暗。血平板上的菌落有β-型溶血環(huán)本菌耐堿不耐酸,在4℃-45℃均能生長,最適生長溫度30℃-37℃。

培養(yǎng)基.png

一、菌株來源

李斯特氏菌是1926年英國南非裔科學家穆里在病死的兔子體內首/次發(fā)現(xiàn)的。為紀念近代消毒手術之父、英國生理學家約瑟夫·李斯特(1827-1912),1940年,在第三屆國際微生物學大會上將其命名為李斯特氏菌。

二、菌株種類

國/際上公/認的李斯特菌共有以下七個菌株:單核細胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)、綿羊李斯特菌(Listeria iuanuii)、英諾克李斯特菌(Listeria innocua)、威爾斯李斯特菌(Listeria welshimeri)、西爾李斯特菌(Listeria seeligeri)、格雷李斯特菌(Listeria grayi)、默里李斯特菌(Listeria murrayi)。其中,單核細胞增生李斯特氏菌是唯1能夠引起人類疾病的,它是一種人畜共患病的病原菌,中毒嚴重的可引起血液和腦組織感染。單核細胞增生李斯特氏菌簡稱單增李斯特氏菌,為革蘭陽性菌,屬厚壁菌門。

三、細菌分型

根據(jù)菌體(O)抗原和鞭毛(H)抗原,將單增李斯特氏菌分成13個血清型,分別是1/2a、1/2b、1/2c、3a、3b、3c、4a、4b、4ab、4c、4d、4e 和“7”13 個血清型。致病菌株的血清型一般為1/2b、1/2c、3a、3b、3c、4a、1/2a和4b,后兩型尤多。該菌與多種革蘭陽性菌有共同抗原,故血清學診斷無意義。

本菌的抗原結構與毒力無關,且本菌與葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌等多數(shù)革蘭氏陽性菌和大腸桿菌有共同抗原,故血清學診斷無意義。

四、形態(tài)與染色

該菌為革蘭氏陽性短桿菌,大小約為0.5μmх1.0-2.0μm,直或稍彎,兩端鈍圓,常呈V字型排列,偶有球狀、雙球狀,兼性厭氧、無芽胞,一般不形成莢膜,但在營養(yǎng)豐富的環(huán)境中可形成莢膜,在陳舊培養(yǎng)中的菌體可呈絲狀及革蘭氏陰性,該菌有4根周毛和1根端毛,但周毛易脫落。

幼齡培養(yǎng)物為革蘭氏陽性,陳舊培養(yǎng)物可轉為革蘭氏陰性,呈兩極著色,易誤認為雙球菌。

五、培養(yǎng)特性

該菌營養(yǎng)要求不高,在20-25℃培養(yǎng)有動力,穿刺培養(yǎng)2-5天可見倒立傘狀生長,肉湯培養(yǎng)物在顯微鏡下可見翻跟斗運動。該菌的生長范圍為2-42℃(也有報道在0℃能緩慢生長),最適培養(yǎng)溫度為35--37℃,在pH中性至弱堿性(pH9.6)、氧分壓略低、二氧化碳張力略高的條件下該菌生長良好,在pH3.8-4.4能緩慢生長,在6.5% NaCl 肉湯中生長良好。在固體培養(yǎng)基上,菌落初始很小,透明,邊緣整齊,呈露滴狀,但隨著菌落的增大,變得不透明。在5-7%的血平板上,菌落通常也不大,灰白色,刺種血平板培養(yǎng)后可產(chǎn)生窄小的β-溶血環(huán)。在0.6%酵母浸膏胰酪大豆瓊脂(TSAYE)和改良Mc Bride(MMA)瓊脂上,用45角入射光照射菌落,通過解剖鏡垂直觀察,菌落呈蘭色、灰色或蘭灰色。

六、生化反應

該菌觸酶陽性,氧化酶陰性,能發(fā)酵多種糖類,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,如發(fā)酵葡萄糖、乳糖、水楊素、麥芽糖、鼠李糖、七葉苷、蔗糖(遲發(fā)酵)、山梨/醇、海藻糖、果糖,不發(fā)酵木糖、甘露/醇、肌醇、阿拉伯糖、側金盞花醇、棉子糖、衛(wèi)矛醇和纖維二糖,不利用枸櫞酸鹽,40%膽汁不溶解,吲哚、硫化氫、尿素、明膠液化、硝酸鹽還原、賴氨酸、鳥氨/酸均陰性,VP、甲基紅試驗和精氨/酸水解陽性。

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