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2. 類(lèi)器官傳代培養(yǎng)之——樣本消化
A：類(lèi)器官數(shù)量不足或體積較小時(shí)： 離心5min棄去上清，添加適量小腸類(lèi)器官緩沖液重懸移入1.5ml離心管，300g離心5min棄去液體進(jìn)行第3步。
B：類(lèi)器官數(shù)量較多或體積較大時(shí)：離心5min棄去上清，添加適量類(lèi)器官傳代消化液D消化2-3min，添加小腸類(lèi)器官緩沖液終止消化，離心5min棄去混合液，添加適量小腸類(lèi)器官緩沖液重懸移入1.5ml離心管，300g離心5min棄去液體進(jìn)行第3步。
類(lèi)器官收集后，添加基質(zhì)膠重懸，每孔25μl基質(zhì)膠鋪在24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，放置培養(yǎng)箱中10-15min添加500μl小腸類(lèi)器官培養(yǎng)基。
Q1：類(lèi)器官培養(yǎng)一代需要多長(zhǎng)時(shí)間？
A：一般需要5-7天，長(zhǎng)得快可3-5天。
Q2: 初始量樣本量10*5，活性大于90%，可以培養(yǎng)出多少類(lèi)器官？
A：培養(yǎng)一代，一般是24孔板的10個(gè)孔。
Q3:原代培養(yǎng)中消化下來(lái)的細(xì)胞是只有干細(xì)胞嗎？
A：消化下來(lái)的細(xì)胞包含各個(gè)種類(lèi)的細(xì)胞，但是能培養(yǎng)成類(lèi)器官的只有成體干細(xì)胞和腫瘤干細(xì)胞，沒(méi)有干性的細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中不會(huì)增殖分化，養(yǎng)的過(guò)程會(huì)死掉。
Q4：想要CTC培養(yǎng)，需要多少樣本量呢？
A：至少50+個(gè)CTC，取樣時(shí)可以多取一些血，CTC細(xì)胞占比比較少。
Q5：類(lèi)器官量多小的時(shí)候不需要加消化液？
A：一般是100um以下。
Q6:如果要做藥篩需要額外去除基質(zhì)膠和培養(yǎng)基嗎？
A：和傳代培養(yǎng)鋪板一樣，藥用培養(yǎng)基稀釋就可以。
Q7：類(lèi)器官培養(yǎng)一定需要基質(zhì)膠嗎？
A：基質(zhì)膠主要是為類(lèi)器官提供支撐作用和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，基質(zhì)膠主要成分有l(wèi)aminin，collagen IV，heparan sulfate proteoglycans。
Q8：取材時(shí)為什么剔除脂肪組織？脂肪肝可以做類(lèi)器官培養(yǎng)嗎？
A：脂肪組織影響后續(xù)消化分離得到的干細(xì)胞純度，脂肪肝也是可以做類(lèi)器官培養(yǎng)的，消化前可以多清洗幾次，去掉表面脂肪。
Q9：類(lèi)器官可以直接用細(xì)胞系培養(yǎng)嗎?
A：用細(xì)胞系培養(yǎng)的不能成為類(lèi)器官，只能稱(chēng)之為細(xì)胞球。
貨號(hào) | 品名 | 規(guī)格 |
abs9514 | Organotial小鼠腸類(lèi)器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9516 | Organotial小鼠肝類(lèi)器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9515 | Organotial小鼠肺類(lèi)器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9517 | Organotial小鼠胰腺類(lèi)器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9446 | Organotial乳腺癌類(lèi)器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9448 | Organotial子宮內(nèi)膜癌類(lèi)器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9445 | Organotial結(jié)直腸癌類(lèi)器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9444 | Organotial肝癌類(lèi)器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9443 | Organotial肺癌類(lèi)器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9449 | Organotial胃癌類(lèi)器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9447 | Organotial胰腺癌類(lèi)器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
貨號(hào) | 品名 | 規(guī)格 | 周期 |
abs9490 | 基質(zhì)膠（標(biāo)準(zhǔn)型、含酚紅） | 1.5ml*8 | 現(xiàn)貨 |
abs9491 | 基質(zhì)膠（標(biāo)準(zhǔn)型、無(wú)酚紅） | 1.5ml*8 | 現(xiàn)貨 |
abs9492 | 基質(zhì)膠（高濃度、含酚紅） | 1.5ml*8 | 現(xiàn)貨 |
abs9493 | 基質(zhì)膠（高濃度、無(wú)酚紅） | 1.5ml*8 | 現(xiàn)貨 |
abs9494 | 基質(zhì)膠（低因子、含酚紅） | 1.5ml*8 | 現(xiàn)貨 |
abs9495 | 基質(zhì)膠（低因子、無(wú)酚紅） | 1.5ml*8 | 現(xiàn)貨 |
abs9496 | 基質(zhì)膠（IPS驗(yàn)證無(wú)酚紅） | 1.5ml*4 | 現(xiàn)貨 |
abs9497 | 基質(zhì)膠（高濃度、低因子、含酚紅） | 1.5ml*8 | 現(xiàn)貨 |
abs9498 | 基質(zhì)膠(高濃度，無(wú)酚紅，低生長(zhǎng)因子) | 1.5ml*8 | 現(xiàn)貨 |
詳見(jiàn)：類(lèi)器官原代培養(yǎng)全流程
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