血液及其他體液進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)的注意事項(xiàng)
1、方法選擇以及TAL試劑選擇
血液的前處理法中,對(duì)于稀釋加熱法和氯仿提取法,雖然使用率很高,但由于易受溫度、時(shí)間以及稀釋倍數(shù)等影響,因此還沒(méi)有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn),而且對(duì)內(nèi)毒素的回收率影響也大。而對(duì)于表面活性處理法,高氯酸法(PCA)或新高氯酸法(New PCA)由于操作簡(jiǎn)便,回收率高,目前在日本的應(yīng)用比較普遍。另外對(duì)于表面活性劑處理,一般認(rèn)為用定量的動(dòng)態(tài)比濁法進(jìn)行測(cè)定,而對(duì)于高氯酸法用比色法更為合適。
據(jù)國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道:用高氯酸或新高氯酸法處理的樣品,一般不能用比濁定量試劑測(cè)定,原因是由美洲鱟裂解液制備的LAL試劑易受各種離子等因素的影響。雖說(shuō)用鱟試劑緩沖液溶解LAL試劑可以避免這種影響,但很少使用。血中測(cè)定時(shí),TAL試劑的選擇也是十分重要的,在我國(guó)現(xiàn)有條件下,更是如此。
2、其他體液的測(cè)定
⑴髓液﹑腹水以及尿:由于含蛋白較少,因此可不進(jìn)行前處理,而取原液直接進(jìn)行內(nèi)毒素測(cè)定;
⑵乳汁:同血漿一樣需要進(jìn)行前處理以去除干擾物質(zhì)。
另外,對(duì)于尿一般情況下可不必處理,然而在尿道感染時(shí),由于作為尿早期快速診斷具有很好的診斷意義,因此,這時(shí)血尿出現(xiàn)時(shí),要和血漿處理一樣,一定要進(jìn)行前處理工作。離心后取上清液進(jìn)行定量檢測(cè),而對(duì)于蛋白尿由于含有血漿的成分,需要對(duì)樣品進(jìn)行10倍稀釋。
另外對(duì)于人工透析液,人工心臟循環(huán)液等回路液測(cè)定時(shí),可不必進(jìn)行前處理。
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