聚山梨醇酯20（Polysorbate 20），商品名為吐溫20（Tween 20），分子結(jié)構(gòu)式見圖2-56，是聚山梨醇酯類中的一種，屬于非離子型表面活性劑，具有乳化、擴散、增溶、穩(wěn)定等作用。在生物制藥行業(yè)中，聚山梨醇酯常用作蛋白乳化劑，可減少蛋白質(zhì)之間原有的相互作用，且不破壞蛋白的結(jié)構(gòu)

聚山梨醇酯20含有較多的親水性基團，沒有強生色官能團，采用常用的反相液相色譜-紫外檢測器較難進行準確的定性與定量測定?；旌弦合嗌V分離模式蒸發(fā)光散射檢測器法，是一種較為理想的方法，但由于該檢測器靈敏度低，重現(xiàn)性差；液質(zhì)聯(lián)用法，分析聚山梨醇酯，由于其成分較復雜，因此定量較麻煩，且儀器使用成本較高；本文嘗試采用一款較新的高靈敏度、通用型檢測器-電霧式檢測器（CAD）進行了分析，CAD是一款通用型的質(zhì)量檢測器。因此，利用這款檢測器，檢測蛋白藥物中的聚山梨醇酯20的含量的方法具有一定的可行性和借鑒意義。

色譜柱：Oasis MAX，30 µm，2.1×20 mm， P/N：186002052；流動相A：2%甲酸的異丙醇溶液，流動相B：2%甲酸水溶液，梯度洗脫，流速1 mL/min，洗脫程序見表2-33。檢測方式：（1）Corona Ultra電霧式檢測器，氮氣（霧化氣）壓力，35 psi，霧化室溫度，30 ℃；采樣頻率，5 Hz。（2）二極管陣列檢測器，波長為280 nm。柱溫：30 ℃；進樣體積：30 µL；測定結(jié)果見圖2-57。

本實驗建立了蛋白類藥物，如某人源化單克隆抗體中聚山梨醇酯20的含量測定方法。經(jīng)過精密度、重復性、線性等方法學考察，表明本方法準確度高，精密度、重現(xiàn)性較好，在9.4-188 µg • mL-1范圍內(nèi)，線性相關(guān)較好（r=0.9994），定量限達1.1 µg • mL-1，可作為藥物及制劑中聚山梨醇酯20的含量測定方法。CAD作為質(zhì)量型檢測器，當需要檢測更低濃度樣品，可以通過適當增大進樣體積，或進行柱后有機相補償，提高化合物的響應(yīng)，降低定量檢出限。同時，由于該檢測器響應(yīng)因子一致，可以通過聚山梨醇酯20的濃度同步對蛋白類藥物進行初步半定量分析?？傮w而言，該方法設(shè)計巧妙，原理新穎，操作使用方便，取得了較理想的結(jié)果，因此具有較好的推廣與借鑒意義。