在生化實(shí)驗(yàn)中,生物緩沖劑會(huì)被經(jīng)常用到,但種類繁多,很多采購(gòu)者不知道如何選擇,可能當(dāng)時(shí)選擇的緩沖劑從表面上看非常符合,但在實(shí)際使用時(shí)卻存有一定的差異性,這就直接導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無(wú)法進(jìn)行下去,可能也浪費(fèi)了大量的金錢(qián)和時(shí)間。這時(shí)能采購(gòu)到適合且性價(jià)比高的緩沖劑尤為重要,那么不同的緩沖劑,它們之間的優(yōu)勢(shì)區(qū)別到底是什么呢?下面,遠(yuǎn)慕生物就Tris-HCL和HEPES緩沖液來(lái)詳細(xì)說(shuō)一下。
Tris-HCl緩沖液
其實(shí),Tris緩沖液在生化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)分析中一直使用得很普遍,它是一種弱堿性緩沖劑,有效PH值在中性,所以Tris-HCl緩沖液的pH在7.5~8.5之間。
Tris-HCl緩沖液的優(yōu)勢(shì)
性能穩(wěn)定,相容性好,和鈣離子、鎂離子在一起不會(huì)產(chǎn)生沉淀現(xiàn)象,但是磷酸鹽與鈣、鎂離子會(huì)產(chǎn)生沉淀。并且由于Tris-HCl緩沖液中的離子電性強(qiáng)度弱,緩沖液離子強(qiáng)度的高低決定著酶類物質(zhì)的失活,所以這對(duì)于酶類測(cè)定很重要。
HEPES緩沖液
HEPES與Tris-HCl緩沖液的不同之處就是它并非是堿性或酸性緩沖液,而是非離子兩性緩沖液,其有效PH范圍在7.2-7.4之間,具有較好的緩沖能力,常用于診斷試劑盒中,以及DNA/RNA的提取試劑盒里。
HEPES緩沖液的優(yōu)勢(shì)
通常它在水中的穩(wěn)定性能佳,pKa值在6-8之間,溶解性能好,不會(huì)產(chǎn)生干擾性,在可見(jiàn)光和紫外光上吸收極低,耐于化學(xué)和酶解作用,且不與金屬離子發(fā)生沉淀現(xiàn)象,其離子濃度、溶液組成和溫度對(duì)解離的影響小。
HEPES和Tris-HCl為粉末狀,在配置成溶液后,建議是即配即用,效果更佳,平時(shí)保存放于干燥室內(nèi)環(huán)境中,不長(zhǎng)期暴露在陽(yáng)光和空氣中即可。
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