C18色譜柱由哪些部件組成？操作時需要注意些什么？

來源：深圳市恒譜生科學(xué)儀器有限公司 2022年12月16日 13:50

　　C18色譜柱是一種裝填有固定相用以分離混合組分的柱管，一般為金屬或玻璃制作而成，有直管型、盤管型、U型管等，被廣泛用于多個領(lǐng)域中。色譜柱主要由那些部件組成呢？下面具體介紹一下色譜柱的組成部件，希望可以幫助到大家。

　　色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好，分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁、有機(jī)聚合物微球(包括離子交換樹脂)、多孔碳等，其粒度一般為3,5,7,10μm等，柱效理論值可達(dá)5~16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效;對于同系物分析，只要500即可；對于較難分離物質(zhì)對則可采用高達(dá)2萬的柱子，因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要。

　　色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成，壓力不高于70 kg/cm2 時，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效，減小管壁效應(yīng)，不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度，其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的，用于細(xì)管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板，是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金，孔徑0.2~20µm(5~10?m)，取決于填料粒度，目的是防止填料漏出。

　　C18色譜柱使用正確十分重要，操作色譜儀稍有不慎就可能會降低柱效縮短其使用壽命甚至損壞。在它的操作過程中需要注意下列問題。

　?、?避免溫度和壓力的急劇變化以及任何機(jī)械震動。溫度的突然變化或使色譜柱從高處掉下都會影響到柱內(nèi)的填充狀況；柱壓的突然降低或升高也會影響到柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該逐漸緩慢操作，但是進(jìn)樣閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。

　　② 應(yīng)該逐漸改變試樣樣品溶劑的組成，特別是在反相色譜中不應(yīng)該把有機(jī)溶劑直接改變?yōu)樗粗嗳弧?/div>

　?、?一般情況下色譜柱不可以反沖，只有廠家說明色譜柱可以反沖時才可以使用反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖就會迅速降低色譜柱效。

　?、?選擇使用適宜的流動相可以避免液相色譜儀固定相被破壞，還可以在進(jìn)樣器前面連接一根預(yù)柱，分析柱為鍵合硅膠時則預(yù)柱為硅膠，能夠使流動相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠飽和可以避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。

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