菌種保藏方法可依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)SN/T2660-2010《食品微生物實(shí)驗(yàn)室菌種保藏方法》進(jìn)行保存。建議實(shí)驗(yàn)室購(gòu)買(mǎi)-80℃超低溫冰箱,選擇甘油保存法或瓷珠菌種保存管,瓷珠菌種保存管方法操作方便,保存時(shí)間較長(zhǎng)。菌株使用過(guò)程中應(yīng)在生物安全柜中進(jìn)行,遵循無(wú)菌操作以防質(zhì)控菌種污染。使用完的菌種應(yīng)按生物安全要求,在121℃高壓滅菌30min,并做好菌種銷(xiāo)毀記錄。
首先、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定菌種管理制度
內(nèi)容包括菌種申購(gòu)、保管、領(lǐng)用、使用、傳代、存儲(chǔ)等方面的內(nèi)容,質(zhì)控菌種申購(gòu)應(yīng)由專人申購(gòu),保管由專人雙人雙鎖管理,領(lǐng)用及使用應(yīng)填寫(xiě)記錄,使用時(shí)應(yīng)對(duì)菌種進(jìn)行純度及生化特性進(jìn)行菌種核查驗(yàn)證并記錄,存儲(chǔ)應(yīng)有專門(mén)的冰箱、超低溫冰箱進(jìn)行存儲(chǔ),使用完的菌株應(yīng)按要求銷(xiāo)毀處理。
第二、實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)需求購(gòu)買(mǎi)相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)菌株或商業(yè)派生菌株作為質(zhì)控菌株
實(shí)驗(yàn)室用質(zhì)控菌種一般來(lái)自認(rèn)可的國(guó)內(nèi)或國(guó)外菌種保藏機(jī)構(gòu)的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株,或與標(biāo)準(zhǔn)菌株所有相關(guān)特性等效的可以溯源的商業(yè)派生菌株。要求包裝可靠,采集迅速,不泄漏不污染。保證菌種合格和環(huán)境安全。因此,需選擇有資質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)菌株的合格供應(yīng)商,每批標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株必須附帶有供應(yīng)商的菌種質(zhì)量證明證、檢測(cè)報(bào)告、說(shuō)明書(shū)等,來(lái)證明所采購(gòu)的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株是合格的。收到菌種時(shí)應(yīng)仔細(xì)閱讀菌種證明,核實(shí)到貨的菌種與申購(gòu)的是否一致,包裝是否完整,注意保存條件及有效期,并將菌種放置相應(yīng)的條件下進(jìn)行儲(chǔ)存(一般在活化前儲(chǔ)存于4℃冰箱中)。核實(shí)后及時(shí)填寫(xiě)菌種清單,菌種清單應(yīng)包括菌種名稱、菌種編號(hào)、到貨日期、儲(chǔ)存條件、購(gòu)買(mǎi)數(shù)量、領(lǐng)用日期、領(lǐng)用人、銷(xiāo)毀日期等。
第三、實(shí)驗(yàn)室需對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌種活化、確認(rèn)、傳代保藏、使用、銷(xiāo)毀進(jìn)行記錄。
記錄內(nèi)容包括質(zhì)控菌種名稱、菌種編號(hào)、到貨日期、菌種完整性、菌種活化日期、活化方法(主要包括活化使用的培養(yǎng)基及培養(yǎng)溫度)、活化數(shù)量、確認(rèn)方法結(jié)果、保藏條件,保存數(shù)量、領(lǐng)用人、傳代日期、傳代數(shù)量、菌種用途、銷(xiāo)毀日期等。菌種確認(rèn)是在活化后對(duì)菌株純度、菌落形態(tài)(在選擇培養(yǎng)基上的典型菌落)、生化特性(如氧化酶試驗(yàn)、三糖鐵試驗(yàn)等)、表型分析(生化鑒定)進(jìn)行核查并記錄,以保證菌種使用的有效性。
微生物實(shí)驗(yàn)室如果從事致病菌檢測(cè)、培養(yǎng)基質(zhì)控驗(yàn)收、方法驗(yàn)證等相關(guān)工作,就應(yīng)該備有質(zhì)控菌株。實(shí)驗(yàn)室需對(duì)使用的質(zhì)控菌株進(jìn)行規(guī)范性管理,以便有效地、安全地使用,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
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