192合成儀是指用來合成多肽的儀器,因為多肽合成的步驟很繁瑣,又很耗時,開發(fā)了自動多肽合成儀。儀器以固相合成為反應原理,在密閉的防爆玻璃反應器中使氨基酸按照已知順序不斷添加、反應、合成,操作Z終得到多肽載體。軟件不僅能自動顯示合成難易程度的預測圖,還能根據(jù)合成方案計算合成所需要的溶劑與試劑量。計算并提供合成試劑的濃度,包括每個單體或者氨基酸應放置的位置。系統(tǒng)還監(jiān)測液體輸送、反應溫度、清洗和排空反應器。當合成完成,軟件會自動清洗合成中用到的容器和管線,以備下次使用。
192合成儀的具體合成由下列幾個循環(huán)組成:
1、去保護:Fmoc保護的柱子和單體必須用一種堿性溶劑去除氨基的保護基團。
2、激活和交聯(lián):下一個氨基酸的羧基被一種活化劑所活化?;罨膯误w與游離的氨基反應交聯(lián),形成肽鍵。在此步驟使用大量的超濃度試劑驅(qū)使反應完成。循環(huán):這兩步反應反復循環(huán)直到合成完成。
3、洗脫和脫保護:多肽從柱上洗脫下來,其保護基團被一種脫保護劑洗脫和脫保護。
192合成儀引物的保存方法:
引物合成后,經(jīng)過一系列處理和純化步驟,旋轉(zhuǎn)干燥而成無色或白色絮狀干粉。
干粉:運輸時常溫運輸,零下二十度可以保存一年。
儲存液:配好后分裝成幾管,避免反復凍融零下二十度可以保存半年。
工作液:常規(guī)使用,四度保存,也可零下二十度保存,但應避免反復凍融。
修飾熒光引物:需要避光保存,盡快使用為宜。
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