凝膠層析分離物質,優(yōu)缺點:
1.凝膠層析操作簡便,所需設備簡單。有時只要有一根層析柱便可進行工作。分離介質—凝膠wan全不需要像離子交換劑那樣復雜的再生過程便可重復使用。
2.分離效果較好,重復性高。最tu出的是樣品回收率高,接近100%。
3.分離條件緩和。凝膠骨架親水,分離過程又不涉及化學鍵的變化,所以對分離物的活性沒有不良影響。
4.應用廣泛。適用于各種生化物質,如肽類、激素、蛋白質、多糖、核酸的分離純化、脫鹽、濃縮以及分析測定等。分離的分子量范圍也很寬,如SephadexG類為102~105d;Sepharose類為105~108d。
5.分辨率不高,分離操作較慢。由于凝膠層析是以物質分子量的不同作為分離依據(jù)的,分子量的差異僅表現(xiàn)在流速的差異上,所以分離時流速必須嚴格把握。因而分離操作一般較慢。而且對于分子量相差不多的物質難以達到很好的分離。此外,凝膠層析要求樣品粘度不宜太高。凝膠顆粒有時還有非特異吸附現(xiàn)象。
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