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單層細胞在細胞瓶中的接種

來源:深圳市安培生物科技有限公司   2023年01月06日 10:40  

原理

單層生長的細胞增殖,融合成片,并長滿細胞瓶表面。有些細胞靠頻繁地換液可維持細胞在平臺期數(shù)天至數(shù)周;而許多其他細胞系需要胰蛋白酶處理、傳代培養(yǎng)后才能存活下來,用胰蛋酶處理可將細胞從生長物表面分離下來以促進傳代培養(yǎng)。后種細胞系不易呈現(xiàn)出接觸抑制并繼續(xù)增殖,達到極限后細胞則從細胞瓶表面脫落, 很難再彌散接種。

材料與儀器

步驟

1) 下列步驟描述胰蛋白酶處理細胞的過程(見下文“胰蛋白酶處理分離細胞”)

2) 重懸細胞于培養(yǎng)液中。

在此時進行細胞計數(shù)嚴好。若記錄傳代次數(shù)以識別細胞的生長經(jīng)歷,可按方便傳代計劃的比例稀釋細胞

3) 分裝細胞懸液于含有合適 PH 的培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中。

傳代細胞在貼壁和再次進行代謝前的大約幾小時中不能自行調(diào)節(jié) PH。傳代期是特別重要的時期.

培養(yǎng)液的 pH 和細胞培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿氣相中的 CO2 含量應(yīng)在接種細胞前平衡好。在細胞加人前將培養(yǎng)液加入培養(yǎng)瓶中,并將蓋子松松地蓋上,置培養(yǎng)箱中放罝 10~15 分鐘即可。

4) 在接受細胞的細胞培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中混勻細胞,將細胞懸液均勻鋪在容器表面、細胞貼壁通常笫 8~10 小時,人二倍體成纖維細胞經(jīng)常按以 1:4 比例,一周傳代一次。細胞倍增時間的估算可采用以下方法:即滿版細胞 1:2 比例傳代后再次鋪滿培養(yǎng)瓶的時間,或以 1:4 比例傳代兩次細胞倍增時間后細胞再次鋪滿。


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安培生物科技有限公司介紹:

安培生物堅持為生命科學(xué)研究、活體動物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細胞治療領(lǐng)域客戶,提供*細胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細胞和多種免疫細胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)。


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