一、原理介紹:
高通量篩選(Highthroughputscreening,HTS)技術(shù)是指以分子水平和細(xì)胞水平的實(shí)驗(yàn)方法為基礎(chǔ),以微板形式作為實(shí)驗(yàn)工具載體,以自動(dòng)化操作系統(tǒng)執(zhí)行試驗(yàn)過程,以靈敏快速的檢測(cè)儀器采集實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù),以計(jì)算機(jī)分析處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),在同一時(shí)間檢測(cè)數(shù)以千萬的樣品,并以得到的相應(yīng)數(shù)據(jù)庫支持運(yùn)轉(zhuǎn)的技術(shù)體系
二、高通量篩選時(shí)每天要對(duì)數(shù)以千萬的樣品進(jìn)行檢測(cè),工作枯燥,步驟單一,操作人員容易疲勞、出錯(cuò)。自動(dòng)化操作系統(tǒng)由計(jì)算機(jī)及其操作軟件、自動(dòng)化加樣設(shè)備、溫孵離心設(shè)備和堆棧4個(gè)部分組成。
三、應(yīng)用領(lǐng)域:充分利用藥用資源、微量篩選系統(tǒng)、高度自動(dòng)化操作、多學(xué)科理論和技術(shù)的結(jié)合、FLIPR熒光檢測(cè)法、AlphaScreen檢測(cè)法。
四、作用:
(1)放射性檢測(cè)技術(shù)美國學(xué)者GanieSM在高通量藥物篩選研究中,應(yīng)用放射性測(cè)定法,特別是親和閃爍(SPA)檢測(cè)方法,使在96孔板上進(jìn)行的樣本量實(shí)驗(yàn)得到發(fā)展。該方法靈敏度高,特異性強(qiáng),促進(jìn)了高通量藥物篩選的實(shí)現(xiàn),但存在環(huán)境污染問題。
(2)AlphaScreen技術(shù)主要優(yōu)勢(shì)在于待測(cè)物質(zhì)的范圍寬泛,從小分子到大型復(fù)合物;均相體系、快速、穩(wěn)定,靈敏度更高;AlphaScreen檢測(cè)也不需要熒光標(biāo)簽的引入,避免了空間位阻影響生物分子的相互結(jié)合;可用于檢測(cè)生物學(xué)粗提物例如細(xì)胞裂解物、血清、血漿、體液等,而不會(huì)影響測(cè)讀效果。
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