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原理
材料與儀器
DMEM培養(yǎng)基 胎牛血清 PBS 戊二醛 乙醇 結晶紫
24孔培養(yǎng)板 槍頭 細胞培養(yǎng)儀
步驟
1.細胞在含有10%FBS的DMEM培養(yǎng)基中生長。
2.細胞以一定密度接種到24孔細胞培養(yǎng)板中，生長24小時后，單層細胞融合度應達到70-80%。
3.不要更換培養(yǎng)基。用新的1ml槍頭輕輕的在單層培養(yǎng)細胞間劃痕，劃痕橫穿過孔，槍頭盡量與板孔的底部垂直，不要傾斜。這樣產(chǎn)生的gap的距離才與槍頭末端的外直徑相等。Gap的距離可以選用不同型號的槍頭調(diào)節(jié)。劃痕在同一方向成一條直線。
4.在垂直與第一條劃痕的方向制作另一條劃痕，每孔劃痕成十字交叉型。
5.劃痕后，用培養(yǎng)基輕輕的清洗板孔2次，以去除脫落細胞。
6.每孔添加新鮮培養(yǎng)基。
7.（培養(yǎng)基中含有某些成分，如抑制/促進細胞遷移和/或增殖的化學物質(zhì)）
8.細胞生長48小時（或根據(jù)時間需要）。
9. 1xPBS清洗細胞兩次，然后使用3.7%多聚甲醛固定30分鐘。
10. 1%的結晶紫（2%乙醇溶解）染色30分鐘。
注意事項
常見問題
gap的距離可通過Photoshop或ImagJ軟件測量，為了降低實驗結果的可變性，建議每孔選擇多個視野觀察，每組做多個重復。
以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎點擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術與產(chǎn)品資訊。
安培生物科技有限公司介紹：
安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細胞治療領域客戶，提供*細胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細胞和多種免疫細胞系等，為制藥公司或者生物技術公司提供無血清細胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術服務，努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)。
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