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原理
材料與儀器
鐵氰-化-鉀 NH4Cl
氧電極測(cè)氧全套裝置 燒杯 微量進(jìn)樣器 洗耳球
步驟
1. 取0.1ml葉綠體提取液加到0.9ml的蒸餾水中并攪拌1min，使葉綠體被膜脹破，加1ml測(cè)定介質(zhì)Ⅰ懸浮備用。
2. 取0.1ml未脹破葉綠體提取液加入反應(yīng)杯中，視反應(yīng)杯體積加入測(cè)定介質(zhì)Ⅱ，加入適量鐵氰-化-鉀和NH4Cl，使鐵氰-化-鉀和NH4Cl的最終濃度都為1mmol/L。攪拌，平衡1min，照光測(cè)定Hill反應(yīng)放氧速率，記錄5min，然后清洗反應(yīng)杯。
3. 將已脹破葉綠體加入反應(yīng)杯中，再加入適量測(cè)定介質(zhì)Ⅱ、鐵氰-化-鉀和NH4Cl，使反應(yīng)體系物質(zhì)最終濃度同未脹破葉綠體測(cè)定體系，測(cè)定過(guò)程同2。
4. 分別計(jì)算脹破和未脹破的葉綠體測(cè)定體系中單位時(shí)間的放氧量（或Hill反應(yīng)速率）。
5. 計(jì)算被膜完整度。
注意事項(xiàng)
1. 本實(shí)驗(yàn)所用玻璃要存放在冰箱中，存放時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，最好現(xiàn)配現(xiàn)用。
2. 葉綠體的分離要在0~4℃下進(jìn)行，玻璃器皿和溶液都須預(yù)冷，操作要快，整個(gè)分離過(guò)程最好在5min內(nèi)完成。
3. 離心過(guò)程中離心機(jī)的轉(zhuǎn)速不宜過(guò)高，否則葉綠體中的淀粉粒會(huì)打破葉綠體被膜。
4. 被膜完整度的測(cè)定過(guò)程中，反應(yīng)杯內(nèi)破碎葉綠體與完整葉綠體的葉綠素含量應(yīng)相等。
常見(jiàn)問(wèn)題
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