RNA可以通過它是否編碼為蛋白質(zhì)被分為編碼RNA和非編碼RNA。編碼RNA主要是mRNA，而在非編碼RNA這一塊，我們今天的主角 microRNAs（miRNAs）主要屬于非編碼RNA中的短鏈非編碼RNA。miRNA大小長(zhǎng)約20-25個(gè)核苷酸，由高等真核生物基因組編碼，通過和靶基因mRNA堿基配對(duì)引導(dǎo)沉默復(fù)合體（RISC）降解mRNA或阻礙其翻譯。

圖1 RNA的分類

雖然第一個(gè)miRNA早在1993年被發(fā)現(xiàn)，一直到最近幾年這類基因的多樣性和廣泛性才被揭示出來。目前，已有大量的研究結(jié)果表明，miRNA在動(dòng)植物生長(zhǎng)發(fā)育、機(jī)體疾病的發(fā)生發(fā)展等領(lǐng)域中起到重要作用。

圖2 miRNA的研究歷程

圖3 miRNA全套解決方案

一、miRNA提取產(chǎn)品及其特點(diǎn)：

表1 愛必信miRNA提取產(chǎn)品

? 操作簡(jiǎn)便快速，只需30多分鐘即可獲得理想的miRNA；
? 采用miRNA富集技術(shù)，使樣本miRNA聚集起來，使之更容易被核酸純化膜吸附純化，大幅提升miRNA的提取效率，較國(guó)內(nèi)部分同類產(chǎn)品CT值小1-2個(gè)；
? 樣本范圍廣，可廣泛應(yīng)用于組織、細(xì)胞、全血、血清、血漿、胸腹水等樣本中miRNA的提取純化，提出后的miRNA可直接用于分子雜交、RT-PCR、RT-qPCR、測(cè)序等各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

二、miRNA逆轉(zhuǎn)錄、qPCR配套產(chǎn)品及其特點(diǎn)：

表2 愛必信miRNA逆轉(zhuǎn)錄+qPCR配套產(chǎn)品

1、miRNA頸環(huán)法逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)品特點(diǎn)：

? 高效的基因工程優(yōu)化的逆轉(zhuǎn)錄酶，可大幅提升miRNA RT反應(yīng)的效率；
? 特別設(shè)計(jì)的莖環(huán)引物能夠特異性地反轉(zhuǎn)錄目的miRNA，獲得加長(zhǎng)的miRNA cDNA，不僅可用于染料法qPCR, 也可用于探針法qPCR；
? 搭配 miRNA莖環(huán)染料法熒光定量PCR試劑盒，可獲得優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)結(jié)果并可免費(fèi)獲得莖環(huán)引物和上下游引物的設(shè)計(jì)和序列信息。

2、miRNA加尾法逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)品特點(diǎn)：

? 基因工程優(yōu)化的Poly A聚合酶，miRNA Poly A聚合高效快速；
? 特別設(shè)計(jì)的含Oligo d(T)的引物，能夠與miRNA Poly A+高效結(jié)合，RT效率高于多家同類試劑；
? 同一RNA一次RT可獲得多個(gè)miRNA的RT產(chǎn)物，后續(xù)可進(jìn)行多個(gè)miRNA的檢測(cè)，節(jié)省樣本用量；
? 可配套 miRNA加尾染料法熒光定量PCR試劑使用，獲得優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)結(jié)果并可免費(fèi)獲得配套的下游引物。

3、miRNA探針法逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)品特點(diǎn)：

? 基因工程優(yōu)化的Poly A聚合酶，miRNA Poly A聚合高效快速；
? 特別設(shè)計(jì)的含Oligo d(T)的引物，能夠與miRNA Poly A+高效結(jié)合，擁有較好的RT效率；
? 同一RNA一次RT可獲得多個(gè)miRNA的RT產(chǎn)物，后續(xù)可進(jìn)行多個(gè)miRNA的檢測(cè)，節(jié)省樣本用量；

配套miRNA探針法熒光定量PCR試劑使用，擁有較染料法qPCR更高的特異性和敏感度。

4、miRNA頸環(huán)法熒光定量產(chǎn)品特點(diǎn)：

? 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，可有效避免非特異擴(kuò)增；
? 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，PCR擴(kuò)增效率高，反應(yīng)靈敏度優(yōu)于多家同類產(chǎn)品；
? 免費(fèi)提供上下游引物設(shè)計(jì)和序列信息，miRNA的擴(kuò)增效果更有保障。

5、miRNA加尾法熒光定量產(chǎn)品特點(diǎn)：

? 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，可有效避免非特異擴(kuò)增；
? 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，PCR擴(kuò)增效率高，擁有更高的反應(yīng)靈敏度；
? 免費(fèi)提供優(yōu)化的Tag Primer，miRNA的擴(kuò)增效果更有保障。

6、miRNA探針法熒光定量產(chǎn)品特點(diǎn)：

? 使用特別設(shè)計(jì)的Taqman探針，qPCR對(duì)miRNA的檢測(cè)較SYBR Green染料法更加特異，可有效避免非特異擴(kuò)增檢測(cè)；
? 能夠更加準(zhǔn)確地對(duì)miRNA進(jìn)行絕對(duì)定量和相對(duì)定量分析，檢測(cè)結(jié)果更加客觀；

配置高效的熱啟動(dòng)Taq酶，反應(yīng)體系經(jīng)充分優(yōu)化，PCR擴(kuò)增效率高，擁有更高的檢測(cè)靈敏度。

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★ 支持miRNA引物定制化服務(wù)；
★ 以上均需提供miRNA名稱/序列/ID號(hào)（提供其中1-2個(gè)信息即可，miRNA名稱和序列最重要）。