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原理
材料與儀器
氯化鈣 蒸餾水 2蔗糖 酶解液
顯微鏡 離心機 離心管 剪刀 鑷子 吸管 培養(yǎng)皿 載玻片 蓋玻片
步驟
1、取材 根據(jù)實驗目的和條件選取不同的材料
2、分離原生質體
（1） 撕葉下表皮
（2）酶解 將撕去下表皮的葉片剪成小塊，放在盛有5mL 酶液的小培養(yǎng)皿中，讓去除下表皮的一面接觸酶液，輔滿一層，在25——28℃下酶解60——90 分鐘
3、收集純化
（1）用吸管將酶解液吸至5mL 離心管中，以600rpm 離心5 分鐘以上，使原生質體沉降
（2）將上清（酶解液）回收，剩下原生質體及殘渣于管底
（3）加氯化鈣液約2mL，輕輕吹打均勻
（4）用注射器向離心管底部緩緩注入蔗糖約2—3mL，出現(xiàn)下部蔗糖液，上部原生質體懸浮液
（5）以600rpm 離心10 分鐘，在兩液相之間出現(xiàn)一條綠色帶，便是純凈的原生質體
4、觀察或培養(yǎng)
取少許原生質體于載片上，蓋片觀察其形態(tài)，或者將原生質體接種在培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，再生植株。
注意事項
常見問題
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