纖維化的定量化

■什么是纖維化？

纖維化是指組織內(nèi)的結(jié)締組織發(fā)生異常增殖的現(xiàn)象?？砂l(fā)生于心臟、肺、肝臟、腎臟、胰腺等除腦部以外的全身幾乎所有主要臟器，發(fā)生纖維化的臟器最終導(dǎo)致功能衰竭。
發(fā)生心肌纖維化后，可能引起舒張性心衰，甚至引起心律不齊或猝死。肺部纖維化將引起間質(zhì)性肺炎，使肺部間質(zhì)變厚變硬，導(dǎo)致肺部收縮，難以吸入氧氣，在平靜狀態(tài)也有可能發(fā)生呼吸停止。肝臟的纖維化將導(dǎo)致肝硬化。另外，引起纖維化的纖維芽細(xì)胞還大量存在于癌間質(zhì)組織內(nèi)，目前正在推進(jìn)其與癌癥的相關(guān)性研究。發(fā)生纖維化的臟器難以恢復(fù)原狀，因此及早發(fā)現(xiàn)并抑制其發(fā)展尤為重要。為評(píng)價(jià)纖維化的進(jìn)展程度，正在開發(fā)利用作為標(biāo)記產(chǎn)生的膠原蛋白或血小板數(shù)、糖鏈生物標(biāo)記等方法。
另外基于對(duì)纖維化缺乏有效的治療藥物，一旦發(fā)病其結(jié)果不可逆的特點(diǎn)，同時(shí)也從再生醫(yī)療的觀點(diǎn)著手開展研究。

■纖維化機(jī)理

在正常組織中，因組織障礙發(fā)生炎癥反應(yīng)后，在巨噬細(xì)胞引起免疫應(yīng)答的同時(shí)，將分泌TGF-β等炎癥因子。炎癥因子可促進(jìn)纖維芽細(xì)胞的增殖及向肌成纖維細(xì)胞的分化。肌成纖維細(xì)胞產(chǎn)生構(gòu)成細(xì)胞外基質(zhì)的膠原蛋白，通過供應(yīng)足量的修復(fù)材料，可治愈炎癥部位。
發(fā)生慢性炎癥后，因過度的損傷修復(fù)反應(yīng)，肌成纖維細(xì)胞不吸收膠原蛋白而導(dǎo)致沉淀，使纖維化繼續(xù)發(fā)展，最終導(dǎo)致臟器的功能衰竭。

■纖維化率的測量事例

在以下實(shí)例中，利用基恩士一體化熒光顯微成像系統(tǒng)BZ-X800，觀察心臟并測量其纖維化率。在纖維化部位觀察中，低倍率下圖像不夠清晰，無法進(jìn)行高精度測量。而在高倍率下，則在不同的觀察位置，測量結(jié)果發(fā)生變化，無法進(jìn)行穩(wěn)定的測量。
因此，為了在保持分辨率的同時(shí)拍攝整體圖像，通過創(chuàng)建拼接圖像，可以穩(wěn)定地獲得高精度結(jié)果。
利用細(xì)胞計(jì)數(shù)功能，能夠輕松測量纖維化發(fā)生部位占整體組織的面積率。

另外，通過保存用于測量纖維化率的測量條件，可對(duì)其他標(biāo)本進(jìn)行批量測量。
能夠簡單且高再現(xiàn)性地評(píng)價(jià)多個(gè)組織間纖維化率差異。

■如果引進(jìn)一體化熒光顯微成像系統(tǒng)BZ-X800

·         針對(duì)無法完整進(jìn)入視野的大切片，一邊移動(dòng)載物臺(tái)一邊獲取圖像，將拍攝的圖像拼接起來，即可合成1張高分辨率圖像。

·         即使標(biāo)本有傾斜、高低差，也能在Z方向獲取多張圖像，只從拍攝的圖像中合成焦點(diǎn)對(duì)準(zhǔn)的部分，可構(gòu)建焦點(diǎn)對(duì)準(zhǔn)整個(gè)標(biāo)本的全幅對(duì)焦圖像。

·         使用混合細(xì)胞計(jì)數(shù)，只從整個(gè)切片中提取纖維化的部分，可自動(dòng)計(jì)算比例。

·         根據(jù)在混合細(xì)胞計(jì)數(shù)中使用的提取條件，使用宏細(xì)胞計(jì)數(shù)，可批量處理多個(gè)圖像。

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