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ELISA試劑盒實驗成功的關(guān)鍵

來源:通蔚試劑(上海)有限公司   2023年02月02日 09:52  

今天讓通蔚生物與您分享一下如何選擇抗體這個問題!

1、一抗質(zhì)量是酶免疫組化、免疫熒光和Western blotting等試驗中的zui關(guān)鍵因素之一。從免疫組化選擇抗體來說,質(zhì)量的公司可能是Chemicon、upstate、Abcam、Dako公司等;從Western blotting選擇抗體來說,信價比的可能是Abcam公司,一般都1ml,價格在2000元每株左右。而一抗訂購中選擇原則有1)選擇單克隆還是多克隆抗體,前者特異性好,而后者靈敏度高;2)選擇何種種屬來源?一般兔來源的多是多克??;而小鼠來源的多是單克隆,但也有另外。這也決定了你的二抗類型。3)檢測何種種屬的抗原,即species reactivity:Hu-human, Ms-mouse, Rat, Goat, Rb-rabbit, Shp-sheep等;這個很重要。4)抗體類型:IgG1/IgG2a/IgM?一旦一抗選為IgM,那么你二抗就必須是抗IgM;5)應(yīng)用范圍:WB, IP, IF, IHC(P), ELISA?一抗說明書中注明抗體可以應(yīng)用于western blotting、免疫沉淀、免疫熒光、免疫組化(石蠟切片)、ELISA試劑盒等等,這根據(jù)你實驗?zāi)康木駬瘛?)抗體公司的選擇,主要根據(jù)信價比的高低以及高質(zhì)量文獻數(shù)據(jù)支持。


2、二抗選擇:一般有生物素標記、HRP標記和熒光素標記的二抗等多種。一抗種屬選擇好后,那么二抗只能是某種抗一抗種屬來源的抗體,如果是酶免疫組化,則可以選擇Bio-或HRP-標記,ELISA試劑盒可以買不同公司單獨的抗體,也可購買二抗染色試劑盒,包括二抗、SP等;而免疫熒光則可以選擇熒光素標記的二抗,可以買美國Abcam公司等熒光素二抗,質(zhì)量還不錯。建議大家可能還是在排除方法、切片中抗原有無等前提下來客觀、正確評價各種抗體的質(zhì)量。


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