IHC專題——抗原修復(fù)

來源：愛必信（上海）生物科技有限公司 2023年02月06日 15:05

在樣本制備的過程中，往往會應(yīng)用一些試劑（如多聚甲醛、福爾馬林等）對新鮮組織進行處理，這個過程可能導(dǎo)致抗原位點被封閉，為了避免影響后續(xù)免疫染色的效果，我們需要先對切片進行抗原修復(fù)。對于石蠟切片來說，抗原修復(fù)是必須的步驟，常用的方法有酶消化法和熱修復(fù)法。

1、酶消化法

作為最早的抗原修復(fù)方法，常用的消化酶有三：胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶K。但酶的作用極易受溫度影響，如果消化不足，則無法充分暴露出抗原位點，過度的消化又會破壞組織結(jié)構(gòu)，影響最后陽性信號的判讀，因此在后續(xù)的發(fā)展中，酶消化法漸漸被熱修復(fù)技術(shù)所替代，但對于個別抗原，如免疫球蛋白、補體，以及在甲醛固定、石蠟包埋的腎活檢中，酶消化法依舊不可替代。

2、熱修復(fù)法

抗原熱修復(fù)是采用高溫、高壓方法配合合適的抗原修復(fù)液，使得被固定液封閉的抗原位點重新暴露，提高抗體的陽性檢出率。

常用的抗原修復(fù)液有兩種：檸檬酸鈉緩沖液（pH=6）、EDTA緩沖液（pH=8或9），一般來說一抗的說明書都會寫明需要選擇哪種修復(fù)液。如果說明書沒有推薦，檸檬酸鈉緩沖液能夠適配大部分的抗體，EDTA緩沖液相對修復(fù)效果更強，但陽性增強的同時也會提高非特異背景，一些比較難表達的抗體可以選擇EDTA緩沖液。

常見熱修復(fù)方法對比

熱修復(fù)方法	微波熱修復(fù)	水浴熱修復(fù)	高壓熱修復(fù)
操作	在染色盒中加入抗原修復(fù)液，放入切片，置于微波爐中高火煮沸，低火維持15min后取出染色盒，冷卻至室溫	在染色盒中加入抗原修復(fù)液，放入切片，置于水溶鍋中加熱，其間不斷用溫度計測其溫度，待抗原修復(fù)液的溫度達到有效溫度（92℃↑），維持40min后取出染色盒，冷卻至室溫	在染色盒中加入抗原修復(fù)液，放入切片，置于高壓鍋內(nèi)加熱至飽壓后繼續(xù)加熱5min，關(guān)閉電源，10min后取出染色盒，冷卻至室溫
優(yōu)點	加熱的時間和溫度都可以有所調(diào)整	溫和，均勻，不易脫片，對組織形態(tài)結(jié)構(gòu)影響少	受熱均勻，暴露抗原位點效果好，受環(huán)境條件影響小，可重復(fù)性高
缺點	時間長，修復(fù)液容易蒸干，需要及時觀察補充；受熱容易不均勻，沸騰易導(dǎo)致脫片；不同微波爐功率有差異，難以標準化	需要較長時間；染色盒材料不同，熱傳導(dǎo)性不同，會影響加熱效果，容易出現(xiàn)抗原表達弱、陽性率低的結(jié)果	易導(dǎo)致脫片；使用高壓鍋要小心蒸汽燙傷，使用要規(guī)范謹防鍋內(nèi)蒸汽過飽和引發(fā)事故

小愛溫馨提示，沒有哪一種抗原修復(fù)液或者修復(fù)方法能夠適配所有的抗體和樣本，最佳條件還是需要在摸索實踐中確定哦！

IHC全套解決方案推薦

任選5件，即享八折！??！

分類	貨號	品名	規(guī)格	貨期
固定	abs9179	4%多聚甲醛/通用型組織固定液	500ml	現(xiàn)貨
抗原修復(fù)	abs9249	檸檬酸鈉-EDTA抗原修復(fù)液(40×)	100ml	現(xiàn)貨
	abs9207	冰凍切片快速抗原修復(fù)液(5×)	100ml	現(xiàn)貨
	abs9208	細胞爬片抗原修復(fù)液（1X）	100ml	現(xiàn)貨
	abs9247	EDTA抗原修復(fù)液(50×)	100ml	現(xiàn)貨
	abs9342	Tris-EDTA抗原修復(fù)液(10×,pH9.0)	100ml	現(xiàn)貨
	abs9248	檸檬酸鈉抗原修復(fù)液(50×)	100ml	現(xiàn)貨
	abs9336	胃蛋白酶抗原修復(fù)液	100ml	現(xiàn)貨
細胞通透（胞內(nèi)指標）	abs9149	Triton X-100/曲拉通X-100	100ml/500ml	現(xiàn)貨
淬滅	abs9333	過氧化物酶封閉液(H2O2法)	100ml	現(xiàn)貨
淬滅	abs9152	吐溫-20	500ml/2.5L	現(xiàn)貨
封閉	abs933	Goat serum	10ml/50ml	現(xiàn)貨
	abs935	驢血清	50ml	現(xiàn)貨
	abs9157	牛血清白蛋白 (BSA)	100g	現(xiàn)貨
一抗	多指標IHC專用一抗（CD3、CD8、CD4、FOXP3、KI-67......）			1-2周
一抗	abs9299	一抗二抗稀釋液	100ml/1L	現(xiàn)貨
二抗	即用型二抗試劑盒（abs957、abs996、abs997、abs998）			現(xiàn)貨
二抗	HRP二抗			現(xiàn)貨
顯色液	abs9210	DAB 顯色試劑盒（棕黃色，IHC）	1kit	現(xiàn)貨
顯色液	abs9211	DAB 顯色試劑盒（藍紫色，IHC）	1kit	現(xiàn)貨
復(fù)染（可選）	abs9214	改良型Mayer's蘇木素染液	100ml/500ml	現(xiàn)貨
封片（DAB顯色）	abs9177	中性樹膠	100ml	現(xiàn)貨
緩沖液	abs962	1×PBS緩沖液	500ml/500ml*10	現(xiàn)貨
	abs952	10*TBST	100ml/1L	現(xiàn)貨
	abs9340	PBST(1×,pH7.4)	500ml	現(xiàn)貨
組化筆	abs929	PAP Pen 組化筆	1支	現(xiàn)貨

相關(guān)產(chǎn)品

免責(zé)聲明

凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責(zé)，不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權(quán)等法律責(zé)任。
如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。

国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

IHC專題——抗原修復(fù)

免責(zé)聲明

聯(lián)系我們

關(guān)注我們