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平時(shí)在實(shí)驗(yàn)過程中我們可能會用到凍存管對樣品進(jìn)行凍存，但是在用液氮進(jìn)行凍存的時(shí)候經(jīng)常會發(fā)生凍存管爆炸的事件，這不僅會使實(shí)驗(yàn)樣品損失，甚至可能會對實(shí)驗(yàn)人員造成傷害。那么如何避免這種情況發(fā)生呢？
液氮滲入凍存管內(nèi)，當(dāng)把凍存管從液氮罐取出時(shí)，液態(tài)氮揮發(fā)，導(dǎo)致體積迅速膨脹而不能及時(shí)排出引起爆炸。具體原因就是1. 凍存管質(zhì)量差；2.凍存管的蓋子沒擰緊，導(dǎo)致液氮進(jìn)入管內(nèi)，當(dāng)從液氮罐取出后或者在水浴加熱復(fù)蘇時(shí)，管內(nèi)液氮迅速氣化，體積急劇膨脹而發(fā)生爆炸。
解決方案：
1. 避免接觸。液氮罐的細(xì)胞留種用，平時(shí)常用細(xì)胞的放-80冰箱就行了，只要不融化，可以保存一年半載沒問題，這就大大降低了從液氮取細(xì)胞的概率。
2. 凍存管。用進(jìn)口的凍存管；沒有的話就盡量使用內(nèi)旋的凍存管，這樣液氮?dú)饣瘯r(shí)相對于外旋的凍存管容易排出，不易爆炸；如果只有外旋的凍存管，那么取出后就盡快倒置凍存管或者水平放置數(shù)十秒，等液氮流出后再復(fù)蘇細(xì)胞。
3. 凍存細(xì)胞時(shí)盡量加多一點(diǎn)凍存液，比如2ml凍存管加1.8ml凍存液，保留少量空間。
4. 凍存細(xì)胞時(shí)凍存管口盡量擰緊。
5. 封口膜的使用。其實(shí)封口膜在液氮中根本不起作用。液氮溫度極低，封口膜因此會變得很脆，不能阻止液氮進(jìn)入，而液氮更容易殘留在管壁和封口膜之間，更加危險(xiǎn)。有些人會用醫(yī)用白膠布在封口處纏一圈，會有一定的作用。
6. 復(fù)蘇前防護(hù)：帶好帆布手套和實(shí)驗(yàn)防護(hù)眼鏡，準(zhǔn)備好鑷子(避免溫度高的手直接接觸凍存管給凍存管升溫，同時(shí)保護(hù)手凍傷或炸傷)。
7. 從液氮里取細(xì)胞的時(shí)候，先在液氮罐上面的蒸汽里放一會，然后再拿出來，將凍存盒殘余的液氮流到罐內(nèi)，避免拿出時(shí)凍傷，也避免細(xì)胞從液氮迅速升到室溫發(fā)生爆炸。
8. 取出凍存管后：①可以先放-80℃冰箱，讓液氮揮發(fā)出來后，再復(fù)蘇；②或者先把管子從液氮中移到冰上，待液氮揮發(fā)；③再或者先將凍存管平放在吸水紙或干毛巾上數(shù)十秒，待管內(nèi)液氮自然流出且揮發(fā)至沒有氣體冒出，再復(fù)蘇細(xì)胞(凍存管直立起來后管內(nèi)液氮很難在短時(shí)間內(nèi)流出和揮發(fā)出，而放平以后，液氮會快速從管縫隙中滲漏出來)；④或者迅速將管子擰松口，幫助液氮快速出來。
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