關(guān)于ELISA實(shí)驗(yàn)常見問題的解答
ELISA實(shí)驗(yàn)原理簡單,步驟少,流程短,試劑盒操作相對簡便,實(shí)驗(yàn)小白也能輕松上手。然而,實(shí)驗(yàn)上手雖快,想要得到可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,卻并不那么容易。為了更好地助力科研實(shí)驗(yàn),今天通蔚生物在這里將大家關(guān)心的ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的常見問題整理如下:
1.你們的ELISA試劑盒能檢測什么物種?
目前我們的試劑盒檢測的種屬主要為人、小鼠、大鼠、猴、兔、豬、雞、植物等,種屬齊全。如果試劑盒的命名帶有特定指向(如人),代表專門針對此物種;沒有指明物種,則代表該試劑盒在目前公司產(chǎn)品涉及的種屬(例如人、小鼠、大鼠、猴、兔等)內(nèi)通用;其他特殊種屬的檢測適用性,請聯(lián)系技術(shù)支持確認(rèn)。
2.白板現(xiàn)象:所有孔的顏色均為無色,即無信號呈現(xiàn)。
可能原因:試劑已過保質(zhì)期,不同批次稀釋液交叉使用;
洗板或者加樣過程中,酶標(biāo)記物被污染失活,稀釋液中含有酶抑制劑如疊氮吶等;
洗滌液是濃縮型的,沒有按比例進(jìn)行稀釋。
3.花板無梯度背景高:在進(jìn)行底物TMB溶液顯色后,酶標(biāo)板中的孔有顏色但沒有梯度,背景較高。
可能原因:底物溶液TMB未置于陰涼避光處保存,實(shí)驗(yàn)前溶液已經(jīng)變藍(lán);
孵育溫度過高或者孵育時(shí)間過長,發(fā)生了較強(qiáng)的非特異性吸附。
4.組織/細(xì)胞樣本收集中提到的“反復(fù)凍融”,過程應(yīng)該如何操作?
(1)組織樣本:組織研磨后,將其-80℃放置1h/液氮放置0.5h,再置于30℃水浴鍋中輕微振蕩,使其迅速融化,反復(fù)操作1-2次即可;
(2)細(xì)胞樣本:按上述操作步驟,反復(fù)凍融2-3次。若為膜蛋白,可以適當(dāng)做超聲處理,但需要控制好超聲的溫度、頻率;
在科研實(shí)驗(yàn)中如何安全,快捷的處理樣本,樣本前處理是酶聯(lián)免疫試驗(yàn)中關(guān)鍵的一步,稍有不慎將導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)滿盤皆輸,試劑盒樣本處理我司專家有辦法,上海通蔚生物ELISA試劑盒樣本處理時(shí)的各種問題 ,只要您有疑問只需來詳詢我司客服。
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