MB80015.2 v.A

 冰凍切片軟骨組織阿爾新藍(lán)（alcian blue）染色試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

主要用途

 冰凍切片軟骨組織阿爾新藍(lán)（alcian blue）染色試劑是一種旨在使用陽(yáng)離子染料阿爾新藍(lán)，使軟骨組織上蛋白多糖聚糖染色，呈現(xiàn)深藍(lán)色，來(lái)分析冰凍組織切片組織中軟骨生成狀況的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心改良、成功實(shí)驗(yàn)證明的。主要適用于冰凍組織切片的細(xì)胞分化和軟骨生成的檢測(cè)。廣泛用于軟骨細(xì)胞或組織病理生理的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，顯色清晰。

技術(shù)背景

間質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cell）分化產(chǎn)生脂肪細(xì)胞（adipocyte）、成骨細(xì)胞（osteoblast）、肌細(xì)胞（myocyte和軟骨細(xì)胞（chondrocyte）。軟骨細(xì)胞及其細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix）構(gòu)成軟骨組織（cartilage tissue），其含有硫酸軟骨素（chondroitin sulfate）和硫酸角質(zhì)素（karatan sulfate）等為主要成分的蛋白多糖（proteoglycan）聚糖（aggrecan），成為軟骨生成（chondrogenesis）的標(biāo)記（indicator）。阿爾新藍(lán)（alcian blue）是一種陽(yáng)離子含銅染料，使酸性粘多糖（mucopolysaccharide）類(lèi)蛋白聚糖染色，呈現(xiàn)深藍(lán)色。

產(chǎn)品內(nèi)容

 清理液（Reagent A）            毫升

 固著液（Reagent B）            毫升

 染色液（Reagent C）            毫升

 去色液（Reagent D）            毫升

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)               1份

保存方式

保存在4℃冰箱里； 染色液（Reagent C），避免光照；試劑具有腐蝕性，注意操作安全。有效保證3月

用戶(hù)自備

小型染色缸：用于石蠟切片的脫蠟操作

光學(xué)顯微鏡：用于組織細(xì)胞染色后觀察分析

實(shí)驗(yàn)步驟

一、 固著處理

1． 

2． 取出10片待測(cè)的冰凍組織切片

3． 小心加上xx微升 清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面

4． 室溫下孵育5分鐘

5． 小心移去切片上的 清理液（Reagent A）

6． 小心加上xx微升 固著液（Reagent B），鋪滿(mǎn)整個(gè)樣品表面

7． 室溫下，孵育60分鐘

8． 小心移去載玻片上的 固著液（Reagent B）

9． 小心加上xx微升 清理液（Reagent A），清洗樣品表面

10． 小心移去載玻片上的 清理液（Reagent A）

11． 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟9至10一次

二、樣本染色處理

1． 小心加上xx微升 染色液（Reagent C），鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面

2． 室溫下孵育60分鐘，避免光照

3． 小心移去切片上的 染色液（Reagent C）

4． 小心加上xx微升 清理液（Reagent A）

5． 室溫下孵育2分鐘

6． 小心移去 清理液（Reagent A）

三、 （選擇步驟）樣本復(fù)染處理

1． 小心加上xx微升 去色液（Reagent D），覆蓋整個(gè)切片樣品表面

2． 室溫下孵育3分鐘（注意：觀察背景藍(lán)色變化，避免過(guò)度褪色）

3． 小心移去 去色液（Reagent D）

4． 小心加上xx微升 清理液（Reagent A）

5． 室溫下孵育2分鐘

6． 小心移去 清理液（Reagent A）

7． （選擇步驟）樣本復(fù)染處理（核固紅）

8． （選擇步驟）樣本透明處理和封片

9． 即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀察：陽(yáng)性細(xì)胞呈現(xiàn)深藍(lán)色，背景呈現(xiàn)淺藍(lán)色調(diào)（如果復(fù)染：細(xì)胞質(zhì)呈現(xiàn)粉紅色，細(xì)胞核呈現(xiàn)紅色）

注意事項(xiàng)

1． 本產(chǎn)品為50次操作

2． 操作時(shí)，須帶手套

3． 試劑具有腐蝕性，注意操作安全

4． 所有操作在室溫下進(jìn)行

5． 試劑溶液在樣品表面時(shí)，避免有氣泡存在，同時(shí)確保鋪滿(mǎn)樣品表面

6． 樣品去色避免過(guò)度

7． 建議使用 核固紅復(fù)染試劑盒（  40011），增強(qiáng)染色對(duì)比度

8． 組織細(xì)胞染色完成后，即刻進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察 

9． 本公司提供系列軟骨組織細(xì)胞染色試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定

2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定顯色清晰