測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱(chēng)為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13B抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A1抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體
氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP合成酶6G抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體
丙型肝炎病毒核結(jié)合蛋白-1抗體
芳香基硫酸酯酶K抗體
神經(jīng)元突觸前膜蛋白抗體
錨定蛋白G抗體
肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin抗體
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型抗體
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體
內(nèi)收蛋白抗體
脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗體
脂聯(lián)素受體1抗體
腎上腺髓質(zhì)素受體抗體
脂聯(lián)素抗體
腎上腺髓質(zhì)素抗體
腺苷受體A3抗體
ADRA2腎上腺素能受體2抗體
相關(guān)產(chǎn)品
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