離心機(jī)分離實(shí)例一

來(lái)源：湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司 2009年05月18日 15:20

豬腎中微粒體膜組分粗品的分離

儀器與試劑

1.超速離心機(jī)（冷凍離心機(jī)）和轉(zhuǎn)頭

2.勻漿緩沖液。50m mol/L Hepes/NaOH （pH7.4），0.33mol/L蔗糖。

3.重懸緩沖液。10m mol/L Hepes/NaOH （pH7.4）。

方法

1.使用韋林?jǐn)嚢杵鳎ㄒ?℃預(yù)冷）在10倍體積（1L）的勻漿緩沖液（要求4℃預(yù)冷），中破碎100g豬腎皮質(zhì)。

2.將勻漿物在離心機(jī)中于8000×g離心15min；

3.小心地轉(zhuǎn)移出上清液，并將其在26000×g離心2min；

4.用重懸緩沖液（要求4℃預(yù)冷）重懸離心得到的微體沉淀至蛋白質(zhì)終濃度約為10mg/ml。這樣得到的微粒體沉淀重懸物就是膜結(jié)合蛋白質(zhì)的來(lái)源

相關(guān)產(chǎn)品

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