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材料與儀器
TE 或去離子水 PCR 產(chǎn)物
離心機和轉(zhuǎn)子 PCR 濾 件 微量離心管
離心機和轉(zhuǎn)子 PCR 濾 件 微量離心管
步驟
一、材料
1. 緩沖液和溶液
TE(lOmmol/L Tris-HCl，lmmol/L EDTA，pH7.5) 或去離子水
2. 核酸和寡核苷酸
待測序的 PCR 產(chǎn)物
3. 離心機和轉(zhuǎn)子
帶有固定傾角轉(zhuǎn)子的小型離心機，如 Eppemlorf5415C
4. 特殊設(shè)備
AmiconMicrocon-PCR 濾件（Millipore) 或者相當(dāng)?shù)漠a(chǎn)品，微董離心管或接收管
二、方法
1. 對每一個待純化的 PCR 產(chǎn)物，都在接收管中放置一個濾件，濾件的儲液面向上
儲液池中加入 400ul 去離子水或 TE，注意加樣時不要觸及膜。加入 100ulPCR 產(chǎn)物，避免帶進(jìn)礦物油。如果 PCR 產(chǎn)物不足 100ul, 用去離子水或 TE 補足，蓋上蓋子。
2. 將 1 中所得組合體用帶有固定傾角轉(zhuǎn)子的離心機，l000 g 離心 15 min(例如，Eppendorf5415C 離心機上 3300r/min)。注意蓋子和管的結(jié)合部朝向轉(zhuǎn)子的中央。
3. 移去濾件，將其放入一干凈的收集管中，有膜面朝上（如果愿意，濾件可以一直
存到樣品分析結(jié)束）。在濾件上小心地加 20ul 去離子水或 TE，注意不要觸及膜，然后將濾件反轉(zhuǎn)過來，放回到干凈的收集管中，使帶有液體的一面朝下。
1. 緩沖液和溶液
TE(lOmmol/L Tris-HCl，lmmol/L EDTA，pH7.5) 或去離子水
2. 核酸和寡核苷酸
待測序的 PCR 產(chǎn)物
3. 離心機和轉(zhuǎn)子
帶有固定傾角轉(zhuǎn)子的小型離心機，如 Eppemlorf5415C
4. 特殊設(shè)備
AmiconMicrocon-PCR 濾件（Millipore) 或者相當(dāng)?shù)漠a(chǎn)品，微董離心管或接收管
二、方法
1. 對每一個待純化的 PCR 產(chǎn)物，都在接收管中放置一個濾件，濾件的儲液面向上
儲液池中加入 400ul 去離子水或 TE，注意加樣時不要觸及膜。加入 100ulPCR 產(chǎn)物，避免帶進(jìn)礦物油。如果 PCR 產(chǎn)物不足 100ul, 用去離子水或 TE 補足，蓋上蓋子。
2. 將 1 中所得組合體用帶有固定傾角轉(zhuǎn)子的離心機，l000 g 離心 15 min(例如，Eppendorf5415C 離心機上 3300r/min)。注意蓋子和管的結(jié)合部朝向轉(zhuǎn)子的中央。
3. 移去濾件，將其放入一干凈的收集管中，有膜面朝上（如果愿意，濾件可以一直
存到樣品分析結(jié)束）。在濾件上小心地加 20ul 去離子水或 TE，注意不要觸及膜，然后將濾件反轉(zhuǎn)過來，放回到干凈的收集管中，使帶有液體的一面朝下。
4.1000 g 離心 2 min, 收集純化的片段。
深圳安培生物科技有限公司，是一家具有核心的技術(shù)實力、壹流的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)?？偛吭O(shè)在廣東，服務(wù)面向全國。安培生物集進(jìn)口試劑、實驗室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，旨在為生命科學(xué)的發(fā)展提供壹流的產(chǎn)品與服務(wù)。本公司建立了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、信號傳導(dǎo)和神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品供應(yīng)線，在各個領(lǐng)域內(nèi)向用戶提供世界前沿水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品，安培生物致力于為廣大的科研機構(gòu)、高等院校等優(yōu)質(zhì)客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、技術(shù)支持與服務(wù)。
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