NSE Elisa試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
NSE Elisa試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
試劑盒組成(貯存于2-8C):
酶標(biāo)板(Coated Wells) 812 酶聯(lián)物(Conjugate Reagent) 12ml
樣品稀釋液(Sample Diluent) 12ml 標(biāo)準(zhǔn)品(Standards) 1 set
終止液(Stop Solution) 12ml TMB顯色液(TMB Solution) 12ml
濃縮洗滌液(20x) 30ml
準(zhǔn)備工作:
濃縮洗滌液(20X)用雙蒸水稀釋成1X(至600ml)。未用完的放回2-8C。
每瓶標(biāo)準(zhǔn)品用1ml雙蒸水重建,靜置20分鐘后輕輕混勻。重建的標(biāo)準(zhǔn)品請(qǐng)貯藏于2-8C。
操作步驟:
試劑盒應(yīng)平衡至室溫再試驗(yàn)。 取出所需反應(yīng)板。
分別加入25ul標(biāo)準(zhǔn)品(Standards)、25ul血清于反應(yīng)板孔中。
每孔加入100ul 樣品稀釋液。輕輕混勻30秒。20-25C溫育30分鐘。
洗板:甩盡板內(nèi)液體,用洗滌液(1x)洗滌反應(yīng)板,并去除水滴(在厚疊吸水紙上拍干);這樣反復(fù)洗滌5次。
每孔加入100ul酶聯(lián)物(Reagent),輕輕混勻10秒。20-25C溫育30分鐘。
洗板:甩盡板內(nèi)液體,用洗滌液(1x)洗滌反應(yīng)板,并去除水滴(在厚疊吸水紙上拍干);反復(fù)洗滌5次。
每孔加入100ulTMB顯色液,輕輕混勻10秒鐘,置室溫溫育20分鐘。
每孔加入100ul終止液(Stop Solution)。輕輕混勻30秒;確定蘭色變?yōu)椋ㄖ匾?)。30分鐘內(nèi)在450nm處讀OD值。
以O(shè)D值為縱坐標(biāo),以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)血清樣品的OD值可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其濃度。
示例:
NSE Values (ng/ml) Absorbance (450nm)
0 0.010
5 0.195
15 0.418
40 0.928
100 1.980
200 3.309
預(yù)期值:健康人NSE的水平小于15ng/ml。本試劑盒的靈敏度:1ng/ml。
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