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ELISA試劑盒實驗標本該如何處理

來源:通蔚試劑(上海)有限公司   2023年05月12日 09:33  

      ELISA試劑盒標本處理復(fù)雜多樣,一不小心沒處理好可能會導(dǎo)致實驗的數(shù)據(jù)偏差。那到底怎么處理才算是比較合理的呢?通蔚試劑生物為您總結(jié)一份ELISA試劑盒實驗標本處理攻略,請收好啦!

一、血清的采集、處理和保存

1.真空采血針采集2ml 新鮮血液,加入無菌試管中。

2.采血后室溫靜置1小時。

3.將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10min,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。

4.取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?-8℃下,可放置保存24-48小時;-20℃下,可放置保存1個月;-70℃下,可放置保存6個月。

5.根據(jù)您的實驗需要,取適量上清夜進行各種ELISA試劑盒測定。大部分ELISA試劑盒檢測均以血清為標本。血清標本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標記的ELISA試劑盒測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。此外還應(yīng)避免細菌污染,因為菌體中可能含有含有內(nèi)源性過氧化物酶,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。血清標本宜在新鮮時檢測。如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA試劑盒中可使本底加深。


二、血漿的采集、處理和保存

1真空采血針采集2ml新鮮血液,加入無菌試管中。

2.按1:9加入抗凝劑(EDTA、草酸鈉、肝素),30分鐘內(nèi)于冰上分離血漿以減少血小板的污染;(也可以直接用抗凝管采集)。

3.將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心5 min,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。

4.取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?-8℃下,可放置保存24-48小時;-20℃下,可放置保存1個月;-70℃下,可放置保存6個月。

5.根據(jù)您的實驗需要,取適量上清夜進行各種ELISA測定。請注意指標說明書上對于抗凝血劑是否有特殊要求,建議使用 EDTA。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。注意事項:制備血漿標本需借助于抗凝劑EDTA, 抗凝的標本因纖維蛋白原干擾而造成假陽性。


三、尿液的采集、處理和保存

1.采集尿液樣本500ul加入無菌試管中。

2.將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10 min,將離心好的樣本留上清,棄下面沉淀。 

3.取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?-8℃下,可放置保存24-48小時;-20℃下,可放置保存 1 個月;-70℃下,可放置保存6個月。


四、細胞上清液的采集、處理和保存

1.采集細胞培養(yǎng)上清液500ul,加入無菌試管中。

2.將采集血液用離心機 4℃,2500rpm 離心 10 min,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。 

3、取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?-8℃下,可放置保存24-48小時;-20℃下,可放置保存1個月;-70℃下,可放置保存6個月。


五、各類組織勻漿的采集、處理和保存

1.采集組織,在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,稱重,剔除附屬的結(jié)締組 織,稱取組織塊。

2.用移液管量取0.1M PBS或者用0.86%冷生理鹽水,勻漿介質(zhì)或生理鹽水的體積總量應(yīng) 該是組織塊重量的9倍,用眼科小剪盡快剪碎組織塊(天然時操作要在冰水浴中進行,將盛有組織的小燒杯放入冰水中)。









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