AntiFix™ 通用抗原修復(fù)緩沖液專為福爾馬林固定石蠟包埋 (FFPE) 組織的熱誘導(dǎo)表位修復(fù) (HIER) 而設(shè)計(jì)。該緩沖液使用專有試劑催化 FFPE 組織中甲醛交聯(lián)的逆轉(zhuǎn)以恢復(fù)抗原反應(yīng)性。

艾美捷抗原修復(fù)液#BTM-22030特征：

在中性 pH 條件下對(duì)多種靶標(biāo)進(jìn)行出色的抗原修復(fù)

簡(jiǎn)化 HIER 優(yōu)化

通過使用酪胺擴(kuò)增的熒光染色進(jìn)行驗(yàn)證

無毒不易燃

用福爾馬林（甲醛）固定組織可以保留組織形態(tài)，但甲醛引起的蛋白質(zhì)交聯(lián)可以修飾抗體結(jié)合位點(diǎn)或表位，因此免疫組織化學(xué)無法再檢測(cè)到它們。傳統(tǒng)上，通過使用蛋白酶處理或通過在低 pH 檸檬酸鹽緩沖液或高 pH Tris 緩沖液中加熱載玻片來恢復(fù)表位反應(yīng)性。不同表位的最佳去掩蔽方法各不相同，需要針對(duì)不同靶標(biāo)使用多種緩沖液。

AntiFix™ 通用抗原修復(fù)緩沖液經(jīng)過精心配制，可在中性 pH 條件下為各種靶標(biāo)提供出色的熱暴露，從而減少對(duì)緩沖液優(yōu)化的需求。它已在使用 HRP 介導(dǎo)的酪胺信號(hào)放大的下一代熒光 CF® 染料對(duì) FFPE 組織進(jìn)行免疫熒光染色時(shí)得到驗(yàn)證。

抗原檢索方案：

注：FFPE切片應(yīng)烘焙在帶正電的幻燈片上，以避免抗原回收過程中的組織損失

1.使用標(biāo)準(zhǔn)方案對(duì)FFPE切片進(jìn)行除石蠟和再水合。

2.將幻燈片放入Coplin罐子或微波爐保險(xiǎn)柜內(nèi)的幻燈片架中

容器注意：微波會(huì)導(dǎo)致玻璃罐破裂。集裝箱應(yīng)在使用前測(cè)試耐熱性。

3.準(zhǔn)備1X AntiFix™ 組合1的通用抗原回收緩沖液體積為10X的緩沖液，含9體積的dH2O并完丨全混合。

4.添加足夠的1X AntiFix™ 緩沖液以完丨全覆蓋組織切片。通常，緩沖區(qū)被添加到磨砂幻燈片標(biāo)簽的級(jí)別。典型的5載玻片的Coplin玻璃罐的體積為40 mL，24載玻片的體積為200 mL架子染色皿。

5.加熱緩沖區(qū)中的幻燈片。使用微波的兩種加熱方法（a）或下面描述多功能炊具（b）。微波是一種由來已久的技術(shù)HIER方法。一種帶數(shù)字溫度控制的廚房多功能鍋（例如，Instant Pot®）是微波爐的一種方便的替代品。其他加熱HIER常用的方法（如熱水浴或商業(yè)傾斜室）。

注：用于紙巾加工的廚房設(shè)備應(yīng)為專用設(shè)備用于研究實(shí)驗(yàn)室，根據(jù)您的要求貼上生物危害標(biāo)簽機(jī)構(gòu)或地方法規(guī)。

a） 使用微波爐：保持載玻片容器未覆蓋或松散覆蓋以避免壓力積聚。用微波爐加熱幻燈片，直到緩沖液沸騰了。持續(xù)監(jiān)控集裝箱，繼續(xù)煮10分鐘，根據(jù)需要每30-60秒停止一次微波爐以防止緩沖液沸騰。煮沸10分鐘后，讓容器冷卻至室溫。

b） 使用多功能鍋：放置隨鍋里的炊具。將滑動(dòng)容器蓋松以避免壓力積聚。將滑動(dòng)容器放在支架上，確保其固定安全地避免傾倒。把鍋里裝滿水，使水位達(dá)到一半向上滑動(dòng)容器。關(guān)上鍋蓋，在98°C下加熱45分鐘沒有壓力。熱處理完成后，小心地移除將容器從鍋中的熱水中取出，冷卻至室溫溫度

6.用dH2沖洗載玻片3次O完丨全移除緩沖區(qū)。

7.根據(jù)您的方案進(jìn)行染色。

抗原修復(fù)液相關(guān)研究：