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糖基化是一種重要的翻譯后修飾，超過(guò) 60% 的生物治療藥物都經(jīng)歷了這個(gè)過(guò)程。而 N-糖結(jié)構(gòu)可以對(duì)藥代動(dòng)力學(xué)、藥效動(dòng)力學(xué)和免疫原性產(chǎn)生影響。因此，進(jìn)行 N-糖分析對(duì)于生物治療藥物的開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)至關(guān)重要，這使得糖基化成為關(guān)鍵質(zhì)量屬性。
隨著時(shí)間的推移，糖基化分析經(jīng)過(guò)了 20 余年的發(fā)展。從過(guò)去需要 1-2 天才能完成的流程，現(xiàn)在已經(jīng)縮短到只需 1-2 小時(shí)即可完成。這不僅讓研究人員能夠更快地獲得結(jié)果和決策依據(jù)，也提高了整個(gè)研發(fā)流程的效率和準(zhǔn)確性。
圖 1. N-糖樣品制備的進(jìn)化歷程
目前，安捷倫主推兩種快速的 N 糖樣品制備流程，分別是 2-AB Express 和 InstantPC。其中，2-AB Express 的前處理時(shí)間為 2 小時(shí)，而 InstantPC 則只需要 1 小時(shí)即可完成。此外，使用 InstantPC 標(biāo)記可以改進(jìn)熒光響應(yīng)和 MS 電離效率。
圖 2. Gly-X N-糖樣品前處理。A) InstantPC 工作流程，包括溶液內(nèi)去糖基化和標(biāo)記，后續(xù)基質(zhì)上凈化；B) 2-AB 工作流程，在溶液內(nèi)進(jìn)行去糖基化，然后進(jìn)行基質(zhì)上標(biāo)記和凈化
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