溴化乙錠(Ethidium bromide,EB)是應(yīng)用早且成熟的核酸染料,并且由于其價(jià)格便宜、靈敏度高,早期被實(shí)驗(yàn)者廣泛應(yīng)用。但其分子量小,很輕易就能穿透細(xì)胞膜,屬于誘變劑,具有高致癌性,對(duì)人體潛在危害非常大。實(shí)驗(yàn)者使用時(shí)需要謹(jǐn)慎再謹(jǐn)慎。
Biotium的GelRed(紅色)和GelGreen(綠色)是熒光染料領(lǐng)域高靈敏、低毒性和超安全的熒光核酸凝膠染色試劑。它可替代溴化乙錠(EB),并且靈敏度遠(yuǎn)高于EB,同時(shí)不需要脫色處理。由于GelRed和EB有相同的光譜特性,因此用它替代EB時(shí)不需要更換成像系統(tǒng)。
GelRed既可用于預(yù)制凝膠也可用于電泳后染色。通常電泳后染色的靈敏度更高,并能排除染料對(duì)DNA遷移的干擾 。使用 GelRed進(jìn)行電泳后染色,操作簡(jiǎn)單,不需要脫色和特殊溶液。只要將染料稀釋在0.1M NaCl 中,并將凝膠置于染色液中,30分鐘后就可以觀察。染色液在室溫下極為穩(wěn)定,可以多次反GelRed&GelGreen,GelRed核酸染料,Biotium復(fù)使用。相比而言,預(yù)制凝膠由于不需要額外染色過程,因此染料用量更少,更為簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì)。
艾美捷GelRed核酸染料的特點(diǎn):
Gelred其水溶染色劑通過美國(guó)環(huán)保局安全認(rèn)定,廢棄物可直接倒入下水道,而不會(huì)造成任何環(huán)境污染。
GelRed核酸染料主要特點(diǎn):
無 毒 性:GelRed獨(dú)-特的油性和大分子量特點(diǎn)使其不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),艾姆斯氏試驗(yàn)結(jié)果也表明,該染料的誘變性遠(yuǎn)小于EB。其水溶染色劑通過美國(guó)環(huán)保局安全認(rèn)定,廢棄物可直接倒入下水道,而不會(huì)造成任何環(huán)境污染。
靈敏度高:適用于各種大小片段的電泳染色,對(duì)核酸遷移的影響小于SYBR Green I。
穩(wěn)定性高: 可以使用微波爐加熱,可以在室溫下保存。
信噪比高:樣品熒光信號(hào)強(qiáng),背景信號(hào)低。
操作簡(jiǎn)單:與EB一樣,在預(yù)制膠和電泳過程中不必?fù)?dān)心染料降解;而電泳后染色過程也只需30分鐘且無需脫色或沖洗 ,即可直接用紫外凝膠透射儀觀察。
適用范圍廣:適用于預(yù)制凝膠(膠染法)和凝膠電泳后染色(泡染法)。
與標(biāo)準(zhǔn)凝膠成像系統(tǒng)完-美兼容 :使用 312nm 激發(fā)的UV凝膠成像系統(tǒng)時(shí), GelRed可以完-美的替代EB。
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